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电泳及转膜 —— 技术服务

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简介蛋白质化学，蛋白质组学技术服务
地区全国
更新日期2025年12月25日

北京农业生物检测中心（公司）

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详细信息
文献和实验
技术资料

服务名称：
电泳及转膜 —— 技术服务
提供商：
北京农业生物检测中心

样品前处理——电泳转膜

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仪器与耗材:

仪器	规格型号	生产厂家
电泳仪	Mini Gel Tank – 3D Virtual Tour	Thermofisher（赛默飞）
电转仪	Invitrogen Power Blotter	Thermofisher（赛默飞）
真空离心浓缩仪	Concentrator plus	Eppendorf（德国）
低温高速离心机	Microfuge 22R Centrifuge	Beckman Coulter（美国）
掌上离心机	D1008	Scilogex（美国）
涡旋仪	MX-S	Scilogex（美国）

试剂	名称编号	规格	生产厂家
电泳预制胶	Willget P05	8%-16%	文渊阁
电泳缓冲液	Willget P08	1L	文渊阁
电转缓冲液	Pierce 1-Step Transfer Buffer	1L	Thermofisher
电泳marker	彩色预染蛋白Marker	10k-170k	Thermofisher
考染染色液	Brilliant Blue R	B105005-25g	阿拉丁
上样缓冲液	SDS Page Loading Buffer	2ml（5x）	云海生物
滤纸	超厚转印滤纸	7.5x10，2.45	伯乐
PVDF膜	Immobilon P Transfer Membrane	0.20um & 0.45um	密理博
超滤管	Millipore Amicon Ultra-0.5	3k	密理博
甲醇	色谱纯甲醇	4L	Thermofisher
纯净水	娃哈哈纯净水	596ml	娃哈哈

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电泳流程:

样品处理：样品“TL06”：3K超滤离心40分钟，上清旋转浓缩至原5倍浓度；样品“TL07”：旋转浓缩至原2倍浓度；对照“CK”：纯净水；
还原处理：上一步的样品及对照,按7:2比例加入上样缓冲液（5X）,涡旋混匀,水浴10min，离心取上清备用；
电泳上样：取第2步样品，Maker，对照CK,按15ul/泳道上样；
电泳分离条件：

程序	电压	时间
空胶空跑	120 v	30 min
浓缩胶	80 v	30 min
分离胶	140 v	110 min

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转膜流程:

胶处理: 分离好的胶，切头去尾（顶部浓缩胶；尾部染料部分），纯净水漂洗2次，取出置于电转缓冲液中润湿5min；
膜处理: 将8cm x 6cm大小的PVDF膜（0.2um，0,45um）各取一张，纯甲醇润湿，纯净水中漂洗2次，取出置于电转缓冲液中润湿5min；
滤纸处理：取滤纸2片纯净水中漂洗2次，取出置于电转缓冲液中；
胶样放置: 依次放置滤纸，0.20um膜，0.45um膜，胶，滤纸
电转条件:

程序	电压	电流	时间
恒流模式	25v	1.3A	20min

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染色结果:

考染：取膜，纯净水漂洗2次，置染色液中轻微摇动2分钟，取出脱色；
脱色：染好后，置50%甲醇水溶液中，轻微摇动1分钟左右；

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文献和实验

该产品被引用文献

产品所引用的文献
1、Activation of sodium channel by a novel-scorpion toxin, BmK NT2, stimulates ERK1/2 and CERB phosphorylation through a Ca2+ dependent pathway in neocortical neurons
下载连接：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28591591
2、Cryo-EM structures of MERS-CoV and SARS-CoV spike glycoproteins reveal the dynamic receptor binding domains
下载连接：https://www.nature.com/articles/ncomms15092/
3、Activation of Aedes aegypti prophenoloxidase-3 and its role in the immune response against entomopathogenic fungi
下载连接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/imb.12318
4、Chemosynthesis and characterization of site-specific N-terminally PEGylated Alpha-momorcharin as a potential agent
下载连接：https://www.nature.com/articles/s41598-018-35969-1