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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
DAPI-Fluoromount-G
- 库存:
4
- 供应商:
研卉生物
- 规格:
20ml
SouthernBiotech公司专门开发出的Fluorescent –G系列是抗荧光淬灭封片剂为您解决荧光信号淬灭问题。该系列荧光封片剂水溶性好,包括偶联DAPI荧光封片剂和不带偶联的荧光封片剂,可在实验最后封片时使用。使用该偶联DAPI荧光封片剂不仅可以减少荧光淬灭,还可同时将细胞核染成蓝色,便于更好的分析实验结果。SouthernBiotech抗淬灭荧光封片剂操作简单,只需要将该荧光封片剂每次只需用1滴,封片后等待5分钟即可检测。适用于组织切片、细胞涂片/爬片。
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文献和实验实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原
PBST, 在摇床上缓慢摇动洗涤5 min,共洗涤3次。 5. 荧光二抗孵育 用吸水纸吸尽洗涤液后滴加稀释好的荧光二抗,湿盒中孵育1h后,回收二抗,接着用PBST洗3次,每次5 min;由于荧光容易淬灭,故从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都要避光。 6. 复染核(定位的关键) 在玻片上滴加DAPI,并注意避光孵育5min,对标本进行染核,然后用PBST洗3次,每次5min,洗去多余的DAPI。 7. 封片 用吸水纸吸干爬片上的液体,用含抗荧光淬灭剂的封片液封片,然后在荧光显微镜下观察
;(2)DAPI工作液室温染色5~20分钟(可根据实验材料的染色结果而定);(3)PBS漂洗;(4)水溶性封片剂封片,游离细胞也可直接用含DAPI的PBS封片;(5)荧光显微镜观察。结果:正常的细胞核呈强荧光,细胞质无荧光;固定的组织细胞同样处理,亦可得到相似的染色结果。在有支原体污染的细胞质和细胞表面可见孤立的点状荧光,在感染痘苗病毒的细胞质中存在独特的“星状”荧光簇(star-like fluorescent clusters),腺病毒感染早期胞质中也可出现荧光。








