苷丙肽放免试剂盒操作说明书

苷丙肽放免试剂盒操作说明书

Galanin （HY-10168） RIA KIT

苷丙肽（Galanin）是含30个氨基酸的神经肽，分子量为3155.56，它广泛分布于中枢和末梢

神经系统、胃肠道、肾上腺髓质、垂体和胰腺等。苷丙肽作为一种神经递质，在内分泌调节和神经传递上都起到重要作用，其生物活性主要为调节胃肠道平滑肌，抑制胰岛素和生长抑素分泌，调节垂体和下丘脑激素分泌功能，调节K⁺通道等。体内苷丙肽变化与Ⅰ、Ⅱ型糖尿病、肝脏疾病，高血压，动脉硬化、心血管疾病、肾脏疾病、胃肠疾病、巴金森氏病、痴呆症、记忆障碍、疼痛等有关。

标本采集：采血前试管内加放抑肽酶30ul/5ml（含150 IU以上）和10%EDTA.Na2 30uL，采血后立即置冰中，30分钟内4℃下2000转/分，离心15分钟取血浆置-20℃待测，可保存3-6个月。测定前，血浆标本需过C₁₈拄。

药盒组成：

1、Galanin抗体一瓶。 2、¹²⁵I- Galanin 标记一瓶。

3、缓冲液一瓶。 4、分离剂（第二抗体）一瓶。

5、去激素血浆一瓶。

6、Galanin标准品为5、10、20、50、100、200pg/mL。

苷丙肽放免试剂盒操作说明书 测定方法：

Galanin ­ RIA 操作程序 （单位：ul）

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试 剂 T NSB S₀ S₁~S₆ 样 品

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缓 冲 液 —— 600 300 300 300

去激素血浆 —— —— 200 200 ——

标 准 品 —— —— —— 200 ——

样 品 —— —— —— —— 200

抗 体 —— —— 100 100 100

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摇匀，4℃ 24小时

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¹²⁵I- Galanin 100 100 100 100 100

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摇匀，4℃ 24小时

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分 离 剂 —— 500 500 500 500

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混匀，室温放置20分钟，4℃3500转/分 离心15分钟，去上清，测定沉淀cpm值

结果计算：

以N/T、B/T计算NSB、S₀结合百分率，以B/B₀计算标准及待测物结合百分率，

在半对数座标纸上绘制标准曲线，并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果.

苷丙肽放免试剂盒操作说明书 注意事项：

本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒标准品每瓶用 ml缓冲液稀释

本月药盒有效期为一个月，分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

附：血浆标本过柱步骤：

1、取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA(缓冲液A )，在4℃下3500转/分 离心20分钟，取上清。

2、在含60%乙晴溶液中加1%TFA，即为缓冲液B，将缓冲液B 3ml对Sep-Pak C₁₈ 柱进行平

衡，接着用缓冲液A 3ml 冲洗。

3、将1处理的上清血浆缓慢注入Sep-Pak C₁₈柱中。

4、用缓冲液A 5ml 以1ml/2分钟速度淋洗Sep-Pak C₁₈ 柱。

5、再用缓冲液B 3ml淋洗Sep-Pak C₁₈，速度为1ml/3分钟，并收集上述淋洗液。

6、将上述淋洗液全部分别装入10ml西林瓶中，-42℃ 冷冻干燥 ，备用。

7、取干燥后的西林瓶用250 ul 0.05M PH 7.4 PB 进行溶解，并在振荡器上振荡3分钟。实

验时取200ul进行加样。操作步骤见说明书。

8、结果计算：最终浓度×5.0

Sep-Pak C-18: Waters.inc. Massachusetts.USA TFA:SIGMA .CO .USA 药盒不提供上述二种试剂（或材料）。

正常参考值：9.16±3.45pg/ml。

本月药盒参考数据：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅ S₆

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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