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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 检测范围:
见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研
- 样本:
血清/组织/尿液
- 库存:
1000
- 供应商:
钰博生物
- 规格:
96t/48t
脲酶试剂盒说明书
Urease(HY-50046)KIT
测定原理
脲酶(Urease)存在于大多数细菌、真菌和高等植物里,也存在于动物血液和尿中。它是一种酰胺酶,能酶促有机物质分子中酶键的水解。它是一种含镍的寡聚酶,具有绝对专一性,特异性地催化脲素水解释放出氨和二氧化碳。并能将尿素分解为氨和二氧化碳或碳酸铵的酶。本试剂盒脲酶活性测定是以尿素为基质经酶促反应后测定生成的氨量进行测定
药盒组成:
试剂一 苯酚钠溶液
试剂二 显色剂
试剂三 标准液 200mg/dl
脲酶试剂盒说明书操作方法:
脲酶操作步骤 ( 单位: ul)
——————————————————————————————————————
空白管 标准管 样本管
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蒸馏水 100 —— ——
标准液 —— 100 ——
样本 —— —— 100
试剂1 200 200 200
—————————————————————————————————————
充分混匀
—————————————————————————————————————
试剂2 150 150 150
蒸馏水 500 500 500
—————————————————————————————————————
混匀、静置20min,空白调零。578nm波长比色
脲酶试剂盒说明书正常参考值:
各实验室应建立自己的正常值,正常参考值仅供参考:
100.9±7.56mg/dl
脲酶试剂盒说明书注意事项:
1. 本法以定值血清为标准,准确性高。
2. 本产品仅用于体外诊断,避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。
3. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
本实验回收系数:96.7%~99.43%
变异系数: 0.73%~2.06%
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文献和实验酶测定大多使用商品试剂盒,由于酶促反应的影响因素较多,造成各实验室间酶活性结果差异较大。为了提高酶活性测定的准确性和精密度,使酶活性测定结果在方法间、实验室间具有可比性,消除参考范围的多重混乱,国际临床化学联合会(IFCC)提出了多种酶测定的推荐方法。我国检验学会也公布了一些酶的推荐方法。当前酶试剂盒生产厂较多,在选购试剂盒时要仔细阅读试剂盒说明书,对试剂盒所用方法的原理、试剂配方(包括缓冲液、底物、添加剂等)有所了解,选择卫生部临床检验中心推荐的常规方法的试剂盒。有些项目没有推荐常规方法,应该选择
排除。2、其次,DAB孵育时间是否太长?做出来那一次我是孵育8min,后来也是8-10min,我单独做了一次实验来排除该因素。结果孵育2、5min时先出现背景,而特异性染色较浅,故这不符合常理,一般先出现特异性染色,然后随着时间的延长,会出现非特异性背景着色。3、最后,血清封闭的问题?以前我一般孵育15-30min,所以我单独做了一次实验用血清封闭室温1h,其它条件同做出来的那一次,结果也一样背景着色很深。4、此外,我在改进的同时,也对PBS清洗不断地延长时间和增加次数,甚至完全参照试剂盒说明书来进行操作(我以前
,一般先出现特异性染色,然后随着时间的延长,会出现非特异性背景着色。 3、最后,血清封闭的问题?以前我一般孵育15-30min,所以我单独做了一次实验用血清封闭室温1h,其它条件同做出来的那一次,结果也一样背景着色很深。 4、此外,我在改进的同时,也对PBS清洗不断地延长时间和增加次数,甚至完全参照试剂盒说明书来进行操作(我以前一般一抗4度过夜且室温复温45min、二抗37度30min、Sp反应37度30min),以及过氧化氢灭活加强等等均未起到效果。 我冷静地分析
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