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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SKBR3
- 库存:
100
- 供应商:
镜像绮点
- 肿瘤类型:
乳腺腺癌
- 细胞类型:
-
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
乳腺组织
- 相关疾病:
乳腺腺癌
- 物种来源:
组织
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
乳腺组织
- 运输方式:
冻存/复苏
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁培养
- 规格:
T25
细胞介绍
1970年G. Trempe 和 L.J. Old从胸水中建立了这株细胞。没有病毒颗粒。超微结构特征包括微丝和桥粒,肝糖原颗粒,大溶酶体,成束的细胞质纤丝。SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物。
细胞特性
1) 来源:器官:乳腺;乳房 疾病:腺癌 取材转移灶:胸水
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备McCOY's 5A(iCell-0011 含NaHCO3 2.2g/L)或DMEM(推荐iCell-128-0001含NaHCO3 1.5g/L;)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 注意:该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好,大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培养基培养细胞时需要提高CO2浓度(7%-10%)。复苏初期细胞贴壁不牢,会有悬浮细胞出现,在传代和换液时注意回收(1000rpm 5min)悬浮的细胞。细胞生长融合到80%以后会有悬浮细胞出现。
3) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
4) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞,传代可以参考以下方法:
1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
业务范围



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文献和实验刚开始养SK-BR-3时,细胞状态不是很好,贴壁也不均匀,于是开始想办法,考虑是不是吹打的不够,或是传得过多,或是其它的什么,后来发现的确如此,细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是:以50平方厘米培养瓶为例,待细胞长满瓶底70%-80%1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶,轻轻晃动培养瓶,让PBS流遍细胞表面,倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次,倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,然后置37度
”。在上述两种物质相互作用的过程中,如果前者占优势,表明乳腺肿瘤患者体内进一步发生病变成为乳腺癌的危险就很低;相反,如果后者占上风,则表明患者体内发生病变成为乳腺癌的危险程度就非常高。这为人类进一步研究有效的药物来治疗女性乳腺癌这一疾病提供了新的可能。 美国犹太医学研究中心的科学家[8]发现了一个可以抑制细胞增殖的蛋白质cdk6, 它对乳腺癌的生长发育起着作用。在乳腺癌细胞中cdk6低水平表达或不表达,而正常细胞相对高水平表达,当两个肿瘤细胞系中cdk6在细胞内表达水平增高时瘤细胞生长明显下降
孔培养体积缩小为 384 孔和 1536 孔形式的建议体积。由于接种体积和密度可能因细胞类型和下游应用而异,因此建议针对检测方案优化条件。 方法和材料 实验可以是贴壁生长癌细胞系的肿瘤干细胞,亦可是McCoy's 5a 培养基中培养的 T-29 人结肠癌细胞、F-12K (Kaighn's Mod.) 培养基中培养的 A549 人肺癌细胞,MCF7 人乳腺癌细胞。 另外,HTB-22™ 和 DU 145 人前列腺癌细胞均在杜氏改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中培养。所有生长培养基均含有
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