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人血清生长激素放免测定盒操作说明书

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    • 供应商：

      钰博生物

    • 检测范围：

      见说明书

    • 检测方法：

      酶联免疫

    • 应用：

      科研

    • 标记物：

      见说明书

    • 样本：

      血清/组织/尿液

    人血清生长激素放免测定盒操作说明书
    HGH（HY-10035） RIA KIT
    临床意义：
    生长激素（HGH）是垂体前叶分泌的糖蛋白激素，分子量为21500，含有191个氨基酸。生长激素是一种调节物质代谢的重要激素，它主要作用是促进肝脏释放葡萄糖，促进脂肪氧化分解，促进蛋白质合成，刺激颅骨、下颌骨增大及软骨肥大、骨骺软骨增生，促进某些肿瘤生长及刺激泌乳。
    测定原理：
    本药盒利用放射免疫分析方法进行测定。在均相竞争抑制反应中采用饱和平衡法，对病人血清样品中GH进行直接测定。测定中，标准品、样品等中的GH与125I-GH竞争限量抗血清的结合位。当被测物中GH的浓度高时，剩余的抗血清结合位就少，从而与抗血清结合125I-GH就少，反之结合就多。利用免疫分离剂分离出抗原－抗血清复合物，并测定复合物中的放射性计数。125I-GH的结合量与样品中GH浓度呈函数关系，通过数据处理可求出样品中GH的含量。
    人血清生长激素放免测定盒操作说明书标本采集：
    取晨空腹的静脉血，分离血清，放2－8℃可保存一周。如不立即测定，血清样品必须在-20℃保存，且不超过30天，应避免反复冻融。严重溶血的样品影响测定结果。
    药合组成及配制：
    1、 125I-HGH 1 瓶。使用时用 ml缓冲液溶解（如不填写，100管用10ml，50管用5ml
    缓冲液溶解）
    2、 HGH抗体 1 瓶。
    3、 HGH标准品 6 瓶，使用时每瓶用1.0ml缓冲液溶解。其浓度分别为0、1、3、9、20、50ng/ml。
    4、 分离剂（第二抗体） 1瓶。
    5、缓冲液1瓶。
    以上各组份试剂应在使用前配制且摇匀使用。
    操作方法：
    试管编号，按下表程序操作。
    HGH RIA 加样步骤 （ 单位: ul）
    管 别
    缓冲液
    标准品
    样品
    125I-HGH
    抗血清
    混匀，37℃放置过夜，任取三管测总T（CPM）。
    分离剂
    NSB管
    100
    100（S0）
    --
    100
    --
    1000
    S0管
    --
    100
    --
    100
    100
    1000
    S1-S末管
    --
    100
    --
    100
    100
    1000
    样品管
    --
    --
    100
    100
    100
    1000
    混匀，室温放置20分钟，离心（3500转/分）15分钟，吸弃上清液，测定各管沉淀的放射性计数（CPM）。
    人血清生长激素放免测定盒操作说明书数据处理：
    1、 计算机处理：建议函数模型采用三次多项式或log～logit法。
    2、 计算、绘图法：
    计算各管的百分率：以S0（cpm数）为B0，各标准管Si（cpm数）为Bi，求各管的百分结合率。
    （1）线性回归：用logX～logitY回归，求出r、a、b值，样品含量可由下式计算得出。
    （2）绘图法：用各标准点计算的结果，在log～logit坐标纸上绘制标准曲线图，未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
    正常叁考值：
    各实验室应建立自己的正常值，下列正常参考值仅供参考：
    HGH＜5ng/ml
    技术特性：
    1、曲线范围：（1～50）ng/ml
    2、灵敏度： < 0.5ng/ml
    3、特异性：HGH抗血清与HRL的交叉反应<9×10-3
    4、精密度：批内CVw<9%，批间CVb<13%
    保存及有效期：
    药盒于（2～8）℃避光保存，切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
    药盒参考数据：
    指标
    B/T（%）
    Bi/B0(%)
    项目
    NSB
    S0
    S1
    S末
    参数

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    • 实验操作篇

      ，不能得到足够的菌量来抽提质粒，摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型，导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多：容易导致裂解不充分，且容易超过硅胶膜柱的承载上限，最终使得质粒提取效率降低，建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当：比如在加入缓冲液重悬菌体时，菌体没有充分分散悬浮，导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解，可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂（QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂），均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用

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