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9003-99-0
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一般描述
辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca2+ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。
应用
Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器,以便检测半乳糖。[1]它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联 苯胺(TMB)的培养基(MRS琼脂板)的组分,用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H2O2 催化分解为O2,并且TMB在O2存在下将菌落染成蓝色。因此,在含5% CO2 的空气环境下孵育48小时后,MRS琼脂上产生H2O2 的菌落呈深蓝色。不产生H2O2 的菌落仍为无色。[2]它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。[3]它还被用于测定溶液中的葡萄糖[4] 和过氧化物[5] 。
辣根过氧化物酶(HRP)分离自辣根中(Amoracia rusticana)。 它可用于生物化学应用,如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子(例如蛋白质)的可检测性。 产品P6782是VI-A型,本质上是一种无盐冻干粉。 它被用于定量胆固醇和胆固醇酯[6],并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积[7]。
生化/生理作用
HRP容易与过氧化氢(H2O2)结合,生成的[HRP-H2O2]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5,在5.0-9.0的pH范围内最稳定。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此,它是最理想的标记物。同时,其糖基化会产生较低的非特异性结合。
辣根过氧化物酶与底物一起孵育时,产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物,以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。
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文献和实验RNA interference using a plasmid construct expressing short-hairpin RNA.
Serene R Lai et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 405, 31-37 (2008-03-29)
辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase
缩写为FRP.为过氧化物酶之一种,含于辣根( horseradish)中。 1941年 F· Thcorell曾提取其结晶。将之吸入细胞或注入之后,以 3, 3′ -二氨基联苯( 3, 3′- diaminobenzidine)为底物进行作用时,在光学或电子显微镜下可以看到一定的标记。最早为 W. Straus( 1959)曾用以鉴别吞噬小体 Ph-agosome. K. Kristensson和 G. Olsson,( 1974)在对利用轴突内逆行运输的神经元、轴突分支的着染,并而用于
2 O A 一般在植物界中广泛存在,但在动物组织中存在的知道的不多。动物组织的过氧化物酶反应是由血红蛋白附属的过氧化物酶作用而来的。对辣根( Armoracialapathifolia)中的这种酶了解得较多, H. Theorell( 1941)已将其结晶而提纯出来。分子量约 4万 4千,一分子含一个作用基氯高铁血红素。此酶的吸收光谱在 640、 500、 402毫微米处为最大吸收。加入 H2 O2 (或 CH3 OOH)时可见到吸收光谱的变化。这是由于过氧化氢和酶的氯
反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。点这里→ 阅读全文 免疫组化SABC法 SABC (Strept Avidin-Biotin Complex) 法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法,是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法:一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC(链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素)+ 辣根
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