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Phusion 定点诱变试剂盒
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嵘崴达
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20 reactions
Phusion 定点诱变试剂盒
货号: F541
产品描述
Thermo Scientific Phusion 定点诱变试剂盒是一种多功能的高效工具,可在任意类型的质粒 DNA 中引入点突变、插入或缺失。借助此试剂盒,使用可引入所需变化的磷酸化引物扩增整个质粒。在5分钟的连接反应中,内含所需突变的扩增后线性 PCR 产物在 T4 DNA 连接酶的作用下完成环化。然后,得到的质粒可以转化为任何感受态大肠杆菌细胞。
Phusion DNA 聚合酶的理想退火温度可能与 Taq 聚合酶存在很大差异。
产品优势
• 稳健可靠的指数级扩增方法
• 对目标质粒无要求,例如特殊载体、限制性位点或甲基化状态
• 无需在单独的步骤中销毁起始模板
• Phusion 热启动 II 高保真 DNA 聚合酶能够较大限度减少不需要的继发突变
• 扩增长达10 kb 的大型质粒
• 聚合酶的热启动修饰可防止扩增非特异性产物以及引物在 PCR 的第一个循环之前出现不需要的降解
• 试剂盒内含 T4 DNA 连接酶;连接之前或之后无需净化步骤
• 兼容所有感受态大肠杆菌细胞菌株
上海嵘崴达实业有限公司,专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品,
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌:
Roche试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
GE试剂,耗材,部分常用现货,周二,周五定货,3周左右。
SIGMA试剂,周一,五定货,3周左右到货。
R&D试剂,周一定货,3-4周到货。
THERMO试剂,部分现货,周三定货,2-3周到货。
ABCAM试剂,国内现货三天左右,期货四周左右。
Peprotech试剂,部分常用现货,周三定货,2-3周到货。
罗氏原料,请来电来邮咨询。
OXOID,BD培养基货期八周左右,部分现货。
MCE激动剂,ACROS、ALFA、阿拉丁等生化试剂现货定购。
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文献和实验1、引物设计:每条引物都要携带有所需的突变位点,引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。2、反应:使用高保真的pyrobest DNA聚合酶 ;循环次数少,一般为12个循环。反应体系:10x pyrobest Buffer 5 uldNTP Mixture(10mM) 1ul 模板DNA(5~50
就过去了。因此,研究人员也在不断开发新的产品,试图跳过样品制备,直接从样品开始PCR。Finnzymes就不久前推出了几个这样的产品。 Phusion® Blood Direct PCR Kit (Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒)就是为全血中DNA的扩增而设计的。它在PCR前无需纯化DNA或进行样品前处理。试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶,适合保真度要求高的实验。此酶掺入率高,聚合能力强,对血液中存在的抑制剂具有极强的耐受能力,甚至当血液浓度
关键词 :定点诱变; 聚合酶 链式反应;大引物 下载全文: 大引物PCR定点诱变技术的研究进展.pdf
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