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LightShift™ Chemiluminescent EMSA Kit
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嵘崴达
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100 Reactions
LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒
货号: 20148
Thermo Scientific LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒是一种非常可靠、灵敏的电泳迁移率变动实验 (EMSA) 系统,用于鉴定和表征蛋白-DNA 结合相互作用。该试剂盒包括用于设置和定制 DNA 结合反应的试剂、用于检测试剂盒系统的一组 DNA 和蛋白提取物、用于生物素标记 DNA 靶标的稳定链霉素亲和素-HRP 偶联物以及用于检测的一种极其灵敏的化学发光底物模块。
LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒的特点:
•非常适合检测细胞核提取物中的低丰度蛋白
• 灵敏度超过放射性和di高辛方法
• 与先前为常用 DNA-蛋白相互作用建立的结合条件兼容
• 包括 EBNA 控制系统以帮助新用户开发工作检测方法并了解用于确认结合相互作用特异性的方法
LightShift EMSA 检测的原理类似于 Western 印迹。生物素末端标记的双螺旋 DNA 与细胞核提取物或纯化因子一起孵育并在天然凝胶上电泳。然后快速(30 分钟)将 DNA 转印到阳性尼龙膜上,进行紫外交联,用链霉素亲和素-HRP 偶联物进行探测,并与底物一起孵育。可在一天内完成从标记到得出结果。
蛋白与 DNA 的相互作用是控制许多细胞过程的关键,包括 DNA 复制、重组和修复、转录和病毒组装。研究基因调控和确定蛋白:DNA 相互作用的核心技术是电泳迁移率实验 (EMSA)。
| 20148 | LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒 | 100 reactions |
| 20150 | Brij-35, 30% Solution | 950 mL |
| 20151 | Immobilized V-8 Protease Kit | Kit/EA |
| 20158 | LightShift Chemiluminescent RNA EMSA Kit | Kit |
| 20159 | tRNA | 100μL |
| 20160 | RNA 3' End Biotinylation Kit | Kit |
| 20163 | RNA 3' End Desthiobiotinylation Kit | Kit |
| 20164 | Magnetic RNA-Protein Pull-Down Kit | Kit |
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文献和实验激活-核转运检测试剂盒仅染色p65,不染色RelB、C-Rel、p50和p52。使用本试剂盒染色后NF-κB呈红色荧光,细胞核呈蓝色荧光.思考信号转导和检测的理论 我做了这样的回答(个人意见.大家可以讨论!): 这种理论上来讲可行,但是实际操作可能拿不到你想要得结果,原因很简单,凭染色来判断是很难区分程度上的差异的,就比如做WB实验,经典的还是化学发光的方法,显色的方法只能得到信号比较强的蛋白,遇到信号比较弱的蛋白就误差很大了, 第二点,并不是所有能进核的蛋白都有结合DNA
Introduction to the EMSA (Gel Shift) Technique
4 polynucleotide kinase. Alternatively, DNA can be labeled with a biotinylated or hapten-labeled dNTP, then probed and detected using an appropriately sensitive fluorescent or chemiluminescent substrate. Pierce offers a chemiluminescent EMSA system (LightShift
形DNA结构、Holliday结构等,故易出现假阳性;测序耗时长(1-3天),常常出现测序无信号等问题。 今年年初,Genloci通过植物基因工程表达产生高纯度的Cruiser™酶,它是一种具天然强活性的核酸内切酶,与CelⅠ同源。该酶能够高效特异地识别异源双链DNA的突变位点,并从突变位点的3’-端高效地切割异源双链DNA,不会出现假阳性。 今年6月,Genloci推出Cruiser™基因敲除检测试剂盒,该试剂盒可广泛应用于精确检测人、哺乳动物、细菌、真菌、病毒以及植物基因的敲除,尤其适用于ZFN
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