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2年
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北诺
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1000
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北诺
BL21 Plyss(DE3)
BL21Condon Plus (DE3)
TB1(DE3)
C41(DE3)
C43(DE4)
Rosetta(DE3)
Origami B (DE3)
Rosetta-gami-B(DE3)
Rosetta-gami(DE3)Plyss
DH5α
Top10
Top10F'
JM109(DE3)
TG1
Xl1-Blue
X10-Gold
HB101
DH10Bac
STBL3菌
BJ5183细菌
PGEX4T-1
PGEX4T-2
PGEX4T-3
PGEX-6P-1
PGEX-KG(不完整)
PET3b
PET5b
PET11a
PET15b
PET20b
PET21b
PET22b
PET24a
PET25b
PET26b
PET27b
PET28a
PET28b
PET30a
PET31a
PET32a
PET35
PET41a
PET43.1
PET50b
PET52b
PET302
PET303
PET-Dsba
PET-GST
PET-His
PET-Trx
PDsred2-ER
PET32a-DsRed2
PET41a-DsRed2
PGEX4T-1-DsRed2
pEGFP-N1
PLPP-STII
PLLP-OmpA
PTrc-CKS
Pmal-c2x
Pmal-p5x
PMBP-C
PMBP-P
PUC19
PET28a-sumo
PET-duet
pACYCDuet-1
pRSFDUET-1
pproexhta
pproexhtB
PcoldI
PcoldI-sumo
PBV220
求交换各种人源基因
PEGFP-N1
PGL-4.15
PRL-TK
PRL-SV40
PCDNA3.1+/(-)
大肠菌株DH5α
大肠菌株JM109
大肠菌株DH10B
大肠菌株BL21(DE3)
pBV220
pET26b
pET30a
pET5b
Rosetta-gami-B(DE3)
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文献和实验Generation of Recombinant Adenovirus Using the Escherichia coli BJ5183 Recombination System
here uses homologous recombination machinery of Escherichia coli BJ5183 to construct plasmids used in generation of adenoviral vectors. With this method, no ligation steps are involved in generating the plasmids, and any region of the adenoviral genome
(细菌内同源重组AdEasy System)一、目的基因的克隆(以pshuttle-CMV质粒为例)步骤1、选择适当酶切位点,进行酶切连接,将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。2、重组质粒鉴定: 酶切鉴定或测序。3、重组质粒扩增,纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。4、用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒,电泳鉴定质粒完全被切开。5、胶回收线性化质粒,以备共转化使用。二、共转化 1、大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 (1)从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌,接种于LB
用PmeI单酶切线性化重组穿梭质粒,电泳鉴定质粒完全被切开。 5. 胶回收线性化质粒,以备共转化使用。 二 共转化 1 大肠杆菌BJ5183电转感受态制备 ² 从新鲜琼脂板上挑取单个BJ5183细菌,接种于LB培养基中,37℃振摇过夜。 ² 接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基,37℃振摇,至OD600 达到0.4。 ² 迅速将培养物置于冰浴中30min,至充分冷却。 ²
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