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北诺
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1000
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北诺
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文献和实验3H-Thymidine Uptake by Cultured Cells
Grow either L cells (Mouse fibroblasts) or chick embryo fibroblasts on coverglasses and then give them H-thymidine for a short period of time. At the end of the labeling period, wash the coverslips in PBSA
实验原理 当淋巴细胞受分裂原(PHA等)或特异性抗原刺激发生转化时，必然伴有DNA的大量合成，若将具有放射性的3HTdR加到培养液内，则可被作为合成DNA的原料而摄入转化中的细胞内，测定细胞内放射性物质的相对数量(以脉冲数表示)，就能客观地反映淋巴细胞对刺激物的应答水平。 3HTdR掺入法最初是利用分离纯的淋巴细胞进行试验，近年来逐渐推广采用微量全血法，该法具有采样少，操作简便，并能较正确地反映整个机体免疫状态等优点
（一）材料及试剂 1．培养基 RPMI-1640或TC199培养液 2．PHA 同形态学方法 3．小牛血清 4．3H-TdR 选用比活性为2Mci~10Mci/mg分子的制品，将1 Mci/ml溶液以生理盐水稀释成100µci/ml，于4℃保存备用。临用时再用培养液稀释成10µci/ml溶液。 5．3%冰醋酸 6．浓甲醛 7．30%H2O2液 8．闪烁液 PPO（2，5二苯
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