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上海远慕生物有限公司
品牌:Omega
货号:TQ2300-01
产品名称:Perfectstart SYBR Green qPCR master mix
Perfectstart SYBY Green qPCR master mix:热启动SYBR Green 实时定量PCR预混液
Perfectstart SYBR Green qPCR master mix(Omega PCR与RT-PCR相关) 上海远慕生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明,敬请来电咨询!
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文献和实验成功做完了逆转录,这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多,即使使用了 qPCR 预混液,也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列(Q411 /Q421 /Q431 /Q441)提供不同颜色的试剂,利用移液过程中的变色效应,追踪移液过程,可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时,引物设计需遵循以下原则:引物长度 18~25bp,产物长度 80~300bp,GC 含量 40~60
几个复孔,选择重复性好的 CT 值参与计算。 (2)CT<30,重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法:从以下几个方面进行问题的排查:①加样准确度;②移液器吸取液体的准确度;③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样,减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系,并且增加模板的稀释梯度,大体积加样。如:原液 cDNA 添加 1μl,可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍,添加 5μl,使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
SYBR Green Quantitative PCR Protocol
12μl of master mix for each well, plus some excess1 Rxn: 10μl SYBR Green Mix 52 Rxn: 520μl SYBR 0.4μl Forward Primer (10μM stock) 20.8μl F
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