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北京鼎国
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箱
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
so that there are no clumps of cells. Incubate on ice for 10 minutes;Centrifuge at 5,000 rpm for 5 minutes at 4°C to pellet the nuclei;Re-suspend nuclei in 600µl of ChIP lysis buffer+1/1000 PMSF+50 units of RNAse inhibitor and incubate on ice for 10 minutes; Sonicate
Clonality - X Chromosome Inactivation Assay
) Forward and reverse primers, each 20 µM (Human Androgen Receptor Gene (HUMARA) CAG trinucleotide repeat microsatellite primers are described in Allen et al) AmpliTaq Gold, 5 U/ml (Perkin Elmer) a 32P-dCTP, 20 µCi/µl (NEN) Gel-Mix 6 (Life Technologies
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