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166
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北京鼎国
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箱
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文献和实验; 2)在 1 小时(室温条件下)或 2 小时(4℃ 条件下)内进行下面的操作:4℃,1900 g 离心 10 分钟; 3)吸取约 1 mL 上清转至洁净的 5 mL 离心管中,16000 g,4℃,离心 10 分钟,小心吸取上清到新的离心管中; 4)放入-80℃ 冰箱中保存; 5)填写样本登记单,记录样本名称、类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。 3、尿液 1)采集中段晨尿,应该尽量选择受试者的「新鲜」尿液 20-100 mL,并注意避免细菌污染,收集前注意对饮食的控制,于 4℃ 临时保存(不得超过
Buffer R-A,适当匀浆后收集合并到1.5ml 离心管。 (d)用带4~6 号针头的1ml 注射器反复吸注10次。 匀浆充分与否是决定RNA 和DNA 得率的关键。匀浆完全时,溶液不再粘稠,很容易从注射器针头上呈不连续滴状滴落,而非连续状。 2.吸取0.4ml 匀浆液转入另一1.5 ml 离心管中,若匀浆体积不足 0.4ml,加Buffer R-A 补充至0.4ml。 3.加0.15ml Buffer R-E,盖紧离心管,旋涡振荡混合均匀或或用步骤1 中使用的注射器反复吸注2~3次
[实验步骤] (一) 提取质粒 1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中,接入含质粒的大肠杆菌,37℃振荡培养过夜。 2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中,4000rpm,离心2min。 3.吸去培养液,使细胞沉淀尽可能干燥。 4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中,充分混匀,室温放置10 min。 5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制),混匀内容物,将离心管放冰上5 min。 6.加入150μl
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