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6个月
- 英文名:
cALP Stain Kit
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大量
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上海沪震
碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。以甘油为基础,加入抗荧光淬灭剂,有强烈的防荧光衰减作用,用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片后,样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。本试剂操作简单,在封片时用枪滴一滴抗荧光淬灭封片液,盖上盖玻片就可以了。当然,此产品不象树胶一样能固定盖玻片。所以封片后,如果方面,可以在四周封一丝中性树胶类物质以固定盖玻片。
保存条件:
2-8℃保存,约18个月有效。
碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)产品用途
主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可以于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质,譬如DNA疫苗和肝素的制备等,还可制备脉冲电泳的染色体DNA及蛋白质印迹。
碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)产品优点:
1、检出限:0.2μmol/ml
2、线性范围:0.2~50μmol/ml
3、试剂盒批内CV:2.1%,试剂盒批间CV:2.6%;
4、回收率:99.4%
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文献和实验碱性磷酸酶偶氮―耦连法 人工合成的磷酸萘酚盐经碱性磷酸酶水解后释放出萘酚,后者立即与重氮盐偶联生成不溶性偶氮色素。 1)孵育液配制 萘酚AS(或萘酚AS-MX) 10―25rug N,N―二甲基甲酰胺液 0.5ml 0.2mol/LTris盐酸缓冲液(pH 8.2―9.2) 50ml 坚牢蓝B(或BB、RR,或坚牢红TR
CaCl2 10ml 2% MgSO4 1ml 【步骤】 (1)将无菌的玻片放入培养皿中,传代时加入适量的细胞悬液,作细胞爬片,呆细胞长满玻片后取出。 (2)PBS冲洗后用冷丙醇固定10min,蒸馏水冲洗数次。 (3)入孵育液中,37℃孵育4-6h。自来水冲洗数次。 (4)2%硝酸钴中浸3-5min,蒸馏水洗数次。 (5)1%的硫化铵中2min,自来水冲洗,自然干燥,封固。 【结果】胞质中阳性反应呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。 2 偶氮偶联法
性血小板减少性紫癜、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、急性淋巴细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。 中性粒细胞碱性磷酸酶的显示方法有偶氮偶联法和钙-钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9.4~9.6的条件下,将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解,产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀,定位于细胞质内酶活性所在之处。钙-钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的β-甘油磷酸钠水解,产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化铵发生反应,形成不溶性棕黑色的硫化钴,定位于酶活性之处。 碱性磷酸酶主要
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