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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 英文名:
ACP Stain kit
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震
酸性磷酸酶染液是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。以甘油为基础,加入抗荧光淬灭剂,有强烈的防荧光衰减作用,用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片后,样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。本试剂操作简单,在封片时用枪滴一滴抗荧光淬灭封片液,盖上盖玻片就可以了。当然,此产品不象树胶一样能固定盖玻片。所以封片后,如果方面,可以在四周封一丝中性树胶类物质以固定盖玻片。
保存条件:
2-8℃保存,约18个月有效。
酸性磷酸酶染液产品用途
主要用在基因诊断试剂盒、基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶,也可以于提取组织中非蛋白成份降解含有蛋白质的杂质,譬如DNA疫苗和肝素的制备等,还可制备脉冲电泳的染色体DNA及蛋白质印迹。
酸性磷酸酶染液产品优点:
1、检出限:0.2μmol/ml
2、线性范围:0.2~50μmol/ml
3、试剂盒批内CV:2.1%,试剂盒批间CV:2.6%;
4、回收率:99.4%
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文献和实验。 9. 自来水冲洗,甩干。 10. 用1:30 的姬姆萨染液染色15min。 11. 自来水冲去染液,用磷酸盐缓冲液临时封片,镜检。 12. 对照实验 将第3 步的腹腔液涂片置50℃温箱中处理30min,使酶失活,再进行6~11 步的同样实验。 五、实验结果 在巨噬细胞的细胞质中,出现许多棕色或棕黑色的颗粒和班块。部分细胞内,酸性磷酸酶极为丰富,整个细胞质区域都有黑色沉淀。中性粒细胞呈现阴性反应。
目的要求 1.熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 基本原理 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内。在溶酶体膜稳定完整时,底物不易渗入,ACP活力微弱或无活性,经固定,在合适pH条件下,膜本身变为不稳定,逐渐改变其渗透性,底物可以渗入,酶活力被显示。 ACP在酸性条件
酸性磷酸酶金属盐―铅法 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)广泛分布于机体各种组织细胞内,主要存在于细胞的溶酶体内.常作为溶酶体标志酶,此外,还存在于内质网和胞质内。在组织退行性变、核酸和蛋白质代谢活动增加时,酸性磷酸酶活性增强。酸性磷酸酶还参与酯类代谢。因此,它在疾病、免疫反应和细胞损伤与修复过程中具有一定生物学意义。 其基本原理是在酸性环境下,底物p―甘油磷酸钠被酸性磷酸酶水解,释放出磷酸,磷酸遇铅离子则生成磷酸铅沉淀,最后与硫化铵作用形成棕褐色硫化铅沉淀。其反应
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