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文献和实验吉姆萨(Giemsa)染色法 :吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。 嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。 PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏三性环境中负电
。常用者为瑞氏(Wright’s)染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。试剂与器材 试剂: 染色液的配制: 1. 姬姆萨(Giemsa)染液的配制 (1)原液配制 Giemsa 粉剂 0.8 g 甘油(医用) 50 ml 甲醇 50 ml 将Giemsa粉剂溶于甲醇中,在乳钵中充分研磨,溶解后再加甘油,混合均匀,置于37~40℃温箱内8~12h,过滤,装入棕色试剂瓶内,密封保存备用。 (2)稀释液 临用时取Giemsa原液5ml,加磷酸盐缓冲液(pH6.4~
染液制备: 1. 称取0.5g吉姆萨粉和22ml甘油; 2. 取少量甘油与吉姆萨粉在研钵内充分混合,研磨至无颗粒; 3. 将剩余的甘油倒入研钵,于56℃保温2h; 4. 加入33ml纯甲醇混匀,即为吉姆萨母液,将其保存于棕色试剂瓶内; 5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen缓冲液和1份吉姆萨母液混合即得染色液。 贴壁细胞染色步骤: 1. 去除培养
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