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LabAssay ™ NEFA/LabAssay 游离脂肪酸

检测试剂盒
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  • 299-94301
  • 2025年08月18日
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    LabAssay™ NEFA

    LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒

    wako

     

     

    在血液中NEFA(Non-esterified Fatty Acid:游离脂肪酸)与白蛋白结合,被转运至外周组织,成为外周组织重要的能源来源。游离脂肪酸的浓度通过脂肪组织释放、外周组织消耗以及肝脏摄取进行调节。

    本产品采用了基于酰基辅酶A合成酶(ACS)、酰基辅酶A氧化酶(ACOD)和3-甲基-N-乙基-N-(β-羟乙基)-苯胺(MEHA)的蓝紫色显色酶法。不可用于体外诊断。

     

    检测原理

    样品中的游离脂肪酸(NEFA)在酰基辅酶A(Acyl-CoA)和腺苷- 5'-三磷酸二钠(ATP)存在下,通过酰基辅酶A合成酶(ACS)的作用,生成酰基辅酶A、AMP以及焦磷酸(PPi)。生成的酰基辅酶A在酰基辅酶A氧化酶(ACOD)的作用下被氧化,同时生成2,3-反式烯酰辅酶A(2,3-trans-Enoyl-CoA)和过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下,与3-甲基-N-乙基-N-(β-羟乙基)-苯胺(MEHA)和4-氨基安替比林(4-Aminoantipyrine)进行定量氧化缩合,生成蓝紫色色素。通过测定这种蓝紫色的吸光度,即可计算样品中的NEFA浓度。

    产品细节图片1

    ◆性能

    ● 标准曲线范围:0.4~1.97 mEq/L

    ● 检测时间:约 20 min

    ● 样品:血清、血浆(小鼠、大鼠、人、犬、猫)

    ● 所需样品量:4 μL

    ● 测定波长:550 nm

     

    ◆试剂盒组成

    1.显色剂A——10 mL用×4瓶

    2.显色剂A溶解液——45 mL×1瓶

    3.显色剂B——20 mL用×4瓶

    4.显色剂B溶解液——90 mL×1瓶

    5.标准溶液(油酸1 mEq/L)——7 mL×1瓶

    ※ 油酸1 mEq/L=1 mmol

     

    ◆标准曲线示例

    产品细节图片2

     

    ◆检测操作方法

    微孔板法

    按下表条件进行反应。

    No.

    标准溶液 蒸馏水或去离子水 样品量 浓度
    1 80 µL 120 µL 4 μL 0.40 mEq/L
    2 120 µL 80 µL 4 μL 0.60 mEq/L
    3 160 µL 40 µL 4 μL 0.80 mEq/L
    4 未经稀释 - 4 μL 1.00 mEq/L
    5 未经稀释 - 8 μL 1.97 mEq/L*1

    *1: 样品量通常是4 μL, 但在这里使用了8 μL。NEFA的浓度需要根据上表校正。

     

     

    Test

    标准

    空白对照

    样品盲检*2

    显色试剂A

    80 μL

    80 μL

    80 μL

    80 μL

    待测物

    血清 4 μL

    标准溶液 4 μL

    蒸馏水或去离子水4 µL

    充分混合*3、37 ℃加热10 min。

    显色试剂B

    160 μL

    160 μL

    160 μL

    160 μL

    样品

    血清 4 μL

    充分混合*3、37 ℃加热10 min。

    恢复至室温,在30 min内以空白作为对照,测定样品和标准溶液的吸光度。

    550 nm 吸光过滤

    *2 普通的样品无需样品盲检。请使用乳糜血清或溶血血清进行测试。

    *3 使用板式搅拌机,在600~1000 rpm下搅拌1 min左右。

     

    ◆加标回收测试

    NEFA的加标回收测试,将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中,n=2。

    人样品

    人样品

    添加量(mEq/L)

    测定值(mEq/L)

    回收量(mEq/L)

    回收率(%)

    血清样品

    -

    0.69

       

    0.4

    1.14

    0.45

    111.80%

    0.61

    1.34

    0.64

    105.70%

    0.78

    1.54

    0.85

    108.50%

    1.01

    1.73

    1.03

    102.30%

    血浆(EDTA)样品

    -

    0.28

       

    0.4

    0.7

    0.43

    105.30%

    0.61

    0.9

    0.62

    102.50%

    0.78

    1.12

    0.84

    106.80%

    1.01

    1.34

    1.06

    105.40%

     

    小鼠样品

    小鼠样品

    添加量(mEq/L)

    测定值(mEq/L)

    回收量(mEq/L)

    回收率(%)

    血清样品

    -

    0.7

       

    0.4

    1.07

    0.37

    91.70%

    0.61

    1.31

    0.61

    100.10%

    0.78

    1.44

    0.74

    94.50%

    1.01

    1.62

    0.92

    91.30%

    血浆(EDTA)样品

    -

    0.62

       

    0.4

    0.99

    0.37

    92.50%

    0.61

    1.29

    0.68

    111.50%

    0.78

    1.38

    0.77

    97.80%

    1.01

    1.62

    1

    99.10%

     

    大鼠样品

    大鼠样品

    添加量(mEq/L)

    测定值(mEq/L)

    回收量(mEq/L)

    回收率(%)

    大鼠血清样品

    -

    0.57

       

    0.4

    1

    0.43

    106.40%

    0.61

    1.21

    0.65

    106.20%

    0.78

    1.4

    0.83

    106.40%

    1.01

    1.57

    1.01

    99.70%

    大鼠血浆(EDTA)样品

    -

    0.41

       

    0.4

    0.86

    0.45

    111.50%

    0.61

    1.07

    0.66

    108.50%

    0.78

    1.27

    0.86

    109.50%

    1.01

    1.44

    1.02

    101.40%

     

    培养基样品

    样品

    添加量(mEq/L)

    测定值(mEq/L)

    回收量(mEq/L)

    回收率(%)

    50%培养基+标准品

    -

    0.03

    -

    -

    0.374

    0.409

    0.38

    101.60%

    0.683

    0.71

    0.68

    99.60%

    0.829

    0.812

    0.782

    94.40%

    1.013

    1.059

    1.03

    101.70%

     

    ◆样品检测示例

    人血清样本

     

    测定值(mEq/L)

    mean

    SD

    CV(%)

    混合人血清,男性

    0.686

    0.688

    0.687

    0.001

    0.2

    混合人血浆(K2EDTA),男性

    0.354

    0.35

    ※0.352

    0.003

    0.8

    ※参考值

     

    20%稀释CD-1(ICR)雄性小鼠正常血清

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    1

    1.119

    1.117

    1.118

    0.001

    0.1

    2

    0.783

    0.793

    0.788

    0.007

    0.9

    3

    0.7

    0.731

    0.715

    0.022

    3.1

    4

    0.795

    0.792

    0.794

    0.002

    0.2

    5

    0.825

    0.833

    0.829

    0.005

    0.6

     

    100%CD-1(ICR)雄性小鼠正常血浆(K2EDTA)

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    1

    0.311

    0.308

    ※0.309

    0.002

    0.6

    2

    0.319

    0.321

    ※0.320

    0.002

    0.6

    3

    0.202

    0.208

    ※0.205

    0.004

    2

    4

    0.173

    0.185

    ※0.179

    0.008

    4.6

    5

    0.293

    0.318

    ※0.305

    0.017

    5.6

    ※参考值

     

    10%稀释雄性Sprague Dawley大鼠正常血清

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    1

    0.3

    0.3

    ※0.300

    0

    0

    2

    0.373

    0.368

    ※0.371

    0.004

    1.1

    3

    0.301

    0.277

    ※0.289

    0.017

    5.8

    4

    0.365

    0.364

    ※0.365

    0

    0.1

    5

    0.403

    0.362

    ※0.382

    0.029

    7.6

    ※参考值

     

    100%雄性Sprague Dawley大鼠正常血浆(K2EDTA)

    样品批次

    测定值(mEq/L)

    Mean

    SD

    CV(%)

    RAT432145

    0.336

    0.33

    ※0.333

    0.004

    1.2

    RAT432146

    0.358

    0.354

    ※0.356

    0.003

    0.8

    RAT432147

    0.311

    0.339

    ※0.325

    0.02

    6

    RAT432148

    0.222

    0.214

    ※0.218

    0.005

    2.6

    RAT432149

    0.522

    0.508

    0.515

    0.01

    1.9

    ※参考值

     

    ◆样品检测示例

    100%雄性比格犬正常血清

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    年龄

    1

    0.654

    0.657

    0.656

    0.0027

    0.4

    4

    2

    0.642

    0.688

    0.665

    0.032

    4.8

    6

    3

    0.419

    0.431

    0.425

    0.009

    2

    6

    4

    0.377

    0.383

    ※0.38

    0.0057

    1.5

    11

    5

    0.887

    0.877

    0.882

    0.007

    0.8

    12

    6

    0.604

    0.595

    0.599

    0.006

    1.1

    6

    7

    0.987

    1.025

    1.006

    0.0267

    2.7

    10

    8

    0.501

    0.51

    0.506

    0.006

    1.2

    4

    ※参考值

     

    100%雄性比格犬正常血浆(EDTA)

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    年龄

    1

    0.44

    0.444

    0.442

    0.0033

    0.7

    4

    2

    0.419

    0.435

    0.427

    0.011

    2.6

    6

    3

    0.311

    0.306

    ※0.308

    0.0037

    1.2

    10

    4

    0.47

    0.487

    0.478

    0.0123

    2.6

    12

    5

    0.472

    0.475

    0.473

    0.005

    1

    6

    6

    0.37

    0.364

    ※0.367

    0.0047

    1.2

    11

    7

    0.789

    0.77

    0.78

    0.0133

    1.7

    10

    8

    0.439

    0.384

    0.411

    0.0387

    9.4

    12

     

    ※参考值

     

    100% 雄性短毛猫正常血清

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    年龄

    1

    0.709

    0.726

    0.717

    0.0117

    1.6

    3

    2

    0.628

    0.642

    0.635

    0.01

    1.6

    3

    3

    1.004

    1.003

    1.004

    0.0053

    0.5

    6

    4

    0.974

    0.987

    0.981

    0.0093

    0.9

    4

    5

    0.624

    0.649

    0.636

    0.017

    2.7

    6

    6

    1.175

    1.212

    1.193

    0.0267

    2.3

    6

    7

    1.086

    0.959

    1.022

    0.0893

    8.8

    1

    8

    0.371

    0.393

    ※0.382

    0.0157

    4.1

    1

    ※参考值

     

    100%雄性短毛猫正常血浆(EDTA)

    序号

    测定值(mEq/L)

    Mean(mEq/L)

    SD

    CV(%)

    年龄

    1

    1.092

    1.107

    1.099

    0.0103

    0.9

    0.5

    2

    0.177

    0.172

    ※0.174

    0.0033

    2

    1

    3

    0.243

    0.24

    ※0.241

    0.0043

    1.7

    3

    4

    0.32

    0.319

    ※0.320

    0.0067

    2.2

    0.5

    5

    0.363

    0.354

    ※0.359

    0.006

    1.7

    3

    6

    0.206

    0.189

    ※0.197

    0.012

    6.2

    3

    7

    0.232

    0.199

    ※0.215

    0.024

    11.1

    0.5

    8

    0.142

    0.12

    ※0.131

    0.016

    12.3

    1

    ※参考值

     

    ◆稀释线性度测试

    产品细节图片3

    产品细节图片4

    产品细节图片5

    了解LabAssay™全系列:labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/1054.html

     

    产品编号 产品名称 产品规格
    299-94301 LabAssay™ NEFA
    LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒
    500 tests

     

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