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- FUJIFILM Wako
- 293-96901
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
LabAssay™ ATX
自分泌运动因子（ATX: Autotaxin）是从人恶性黑色素瘤细胞的培养上清中分离出的一种分子量为125 kDa的糖蛋白，也是一种细胞迁移促进因子。肝纤维化等肝脏疾病会抑制ATX的代谢，从而导致血液ATX水平升高。
本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清中的ATX。使用酶标仪即可快速简便地检测样品中的ATX。
※LabAssay™系列是研究用试剂，不可用于诊断。
◆试剂盒组成
|
150 tests |
|
|
反应液 |
16 mL |
|
底物溶液 |
1支（8 mL用） |
|
ATX标准品 |
2支 |
|
缓冲液 |
5 mL |
|
反应终止液 |
16 mL |
◆试剂盒性能
|
物种 |
人、小鼠、大鼠 |
|
样品 |
血清、血浆（肝素）、细胞培养上清※ |
|
标准曲线范围 |
1.72-55 U/L |
|
所需样品量 |
10 μL |
|
检测时间 |
约40 min |
|
检测方法 |
显色法（主波长546 nm/副波长700 nm） |
※ 能否检测因培养基而异。当使用细胞培养上清作为样品时，请先对培养基进行加标回收测试或稀释线性实验。
◆标准曲线示例
◆原理
样品中的ATX具有溶血磷脂酶D活性，可水解溶血磷脂酰胆碱，生成胆碱。由此产生的胆碱在胆碱氧化酶（COD）的作用下被氧化，生成过氧化氢。生成的胆碱在胆碱氧化酶（COD）的作用下被氧化，生成过氧化氢。生成的过氧化氢被定量氧化，并在过氧化物酶（POD）的作用下与 N-乙基-N-（3-磺丙基）-3-甲/基苯胺（TOPS）和 4-氨基安替比林缩合，生成蓝紫色色素。最后，加入反应终止液终止反应，测量吸光度以确定样品中的ATX活性。
◆数据
精确度测试（批内差异）
使用本产品分别对人、小鼠、大鼠的2种浓度血清、血浆（肝素）样品进行5次重复检测，确认再现性（精确度）。
|
n＼ID |
人 |
小鼠 |
大鼠 |
|||||||||
|
血清1 |
血清2 |
血浆1 |
血浆2 |
血清1 |
血清2 |
血浆1 |
血浆2 |
血清1 |
血清2 |
血浆1 |
血浆2 |
|
|
1 |
24.5 |
6.31 |
26.3 |
6.75 |
36.4 |
6.64 |
35 |
5.92 |
25.6 |
9.95 |
24.2 |
10.3 |
|
2 |
24.5 |
6.55 |
26.4 |
6.94 |
37.3 |
6.58 |
35 |
5.92 |
24 |
9.82 |
24 |
10.3 |
|
3 |
25.1 |
6.44 |
26.8 |
6.89 |
36.3 |
6.73 |
34.9 |
5.97 |
23.9 |
10.2 |
24.7 |
10.6 |
|
4 |
25.2 |
6.61 |
26.8 |
7.06 |
37.2 |
6.7 |
34.9 |
5.95 |
24.5 |
10 |
24.5 |
10.5 |
|
5 |
25.1 |
6.43 |
26.7 |
6.86 |
36.2 |
6.66 |
34.9 |
5.93 |
24.5 |
10 |
24.5 |
10.5 |
|
mean |
24.9 |
6.47 |
26.6 |
6.9 |
36.7 |
6.66 |
34.9 |
5.94 |
24.5 |
10 |
24.4 |
10.4 |
|
SD |
0.35 |
0.12 |
0.23 |
0.11 |
0.53 |
0.058 |
0.055 |
0.024 |
0.67 |
0.14 |
0.28 |
0.13 |
|
CV(%) |
1.4 |
1.8 |
0.88 |
1.6 |
1.4 |
0.86 |
0.16 |
0.4 |
2.8 |
1.4 |
1.1 |
1.3 |
【结果】
人样品的CV（%）为0.88-1.8％，小鼠样品的CV（%）为0.16-1.4％，大鼠样品的CV（%）为1.1-2.8％，结果良好。
再现性测试（批间差异）
使用本产品在4天内分别对3种不同浓度的人、小鼠、大鼠血清、血浆（肝素）样品进行3次重复检测。
检测单位：U/L
|
Day＼ID |
人 |
小鼠 |
大鼠 |
||||||||||||||
|
血清1 |
血清2 |
血清3 |
血浆1 |
血浆2 |
血浆3 |
血清1 |
血清2 |
血清3 |
血浆1 |
血浆2 |
血浆3 |
血清1 |
血清2 |
血清3 |
血浆1 |
血浆2 |
|
|
0 |
24.4 |
18.2 |
13.7 |
26.3 |
18.7 |
14 |
41.1 |
20.6 |
9.88 |
39.8 |
20 |
9.32 |
21.7 |
15.9 |
11.8 |
21.2 |
15.1 |
|
1 |
24.6 |
18.3 |
13.8 |
26.5 |
18.7 |
14 |
40.9 |
20.4 |
9.82 |
39.5 |
19.9 |
9.31 |
22 |
16 |
11.9 |
21.3 |
15.2 |
|
2 |
23.6 |
17.5 |
13.8 |
25.4 |
18.3 |
14.6 |
40 |
20.2 |
10.1 |
40.1 |
20.2 |
9.9 |
22.7 |
16.6 |
13 |
22.3 |
15.6 |
|
3 |
23.6 |
17.5 |
13.8 |
25.4 |
18.3 |
14.6 |
39.4 |
20.1 |
10.1 |
39.4 |
20.1 |
9.88 |
22.8 |
16.9 |
13.1 |
22.5 |
15.7 |
|
mean |
24.1 |
17.9 |
13.8 |
25.9 |
18.5 |
14.3 |
40.4 |
20.3 |
10 |
39.7 |
20.1 |
9.6 |
22.3 |
16.4 |
12.5 |
21.8 |
15.4 |
|
SD |
0.53 |
0.43 |
0.05 |
0.58 |
0.23 |
0.35 |
0.79 |
0.22 |
0.15 |
0.32 |
0.13 |
0.33 |
0.54 |
0.48 |
0.7 |
0.67 |
0.29 |
|
CV(%) |
2.2 |
2.4 |
0.36 |
2.3 |
1.2 |
2.4 |
2 |
1.1 |
1.5 |
0.8 |
0.64 |
3.5 |
2.4 |
2.9 |
5.6 |
3.1 |
1.9 |
【结果】
人样品的CV（%）为0.36%-2.2%、小鼠血清样品的 CV（%）为0.64-3.5%，大鼠血清样品的 CV（%）为1.9-5.6%，所有结果均良好。
稀释线性实验
使用产品附带的标准品稀释液，按倍数稀释2种浓度的人血清/血浆（肝素）、小鼠血清/血浆（肝素）和大鼠血清/血浆（肝素）后，进行检测并确认线性关系（平行检测两次）。
加标回收测试
向人血清/血浆（肝素）、小鼠血清/血浆（肝素）和大鼠血清/血浆（肝素）中添加3种浓度的标准品，并进行加标回收测试（平行检测两次）。
人
|
添加量(U/L) |
实测值(U/L) |
回收量(U/L) |
回收率(%) |
|
|
血清 |
- |
5.95 |
- |
- |
|
8.05 |
13.8 |
7.85 |
97.5 |
|
|
24.2 |
28.2 |
22.3 |
92.1 |
|
|
40.3 |
44.9 |
39 |
96.8 |
|
|
血浆 (肝素) |
- |
7.29 |
- |
- |
|
7.69 |
14.6 |
7.31 |
95.1 |
|
|
23.1 |
28.6 |
21.3 |
92.2 |
|
|
38.5 |
46.9 |
39.6 |
103 |
小鼠
|
添加量(U/L) |
实测值(U/L) |
回收量(U/L) |
回收率(%) |
|
|
血清 |
- |
10.1 |
- |
- |
|
6.08 |
16.8 |
6.7 |
110 |
|
|
12.2 |
21.6 |
11.5 |
94.3 |
|
|
24.3 |
32.8 |
22.7 |
93.4 |
|
|
血浆 (肝素) |
- |
11.2 |
- |
- |
|
6.57 |
17.6 |
6.4 |
97.4 |
|
|
13.1 |
23.8 |
12.6 |
95.9 |
|
|
26.3 |
36.4 |
25.2 |
95.9 |
大鼠
|
添加量(U/L) |
实测值(U/L) |
回收量(U/L) |
回收率(%) |
|
|
血清 |
- |
10.5 |
- |
- |
|
7.42 |
18 |
7.5 |
101 |
|
|
14.8 |
24.3 |
13.8 |
93 |
|
|
29.7 |
38.5 |
28 |
94.4 |
|
|
血浆 (肝素) |
- |
10.7 |
- |
- |
|
7.48 |
18 |
7.3 |
97.6 |
|
|
15 |
24.2 |
13.5 |
90.2 |
|
|
29.9 |
38.1 |
27.4 |
91.6 |
【结果】
均得到良好的回收率。
与其他公司产品的相关性
分别使用本产品和其他公司产品R对同一人血清/血浆（肝素）样品进行检测，确认检测值的相关性。检测方法以各试剂盒的检测操作方法为准。
|
Sample No. |
血清 |
Sample No. |
血浆（肝素） |
||
|
本产品 (U/L) |
其他公司产品R (ng/mL) |
本产品 (U/L) |
其他公司产品R (ng/mL) |
||
|
1 |
8.03 |
209 |
15 |
8.49 |
193 |
|
2 |
8.92 |
202 |
16 |
8.76 |
198 |
|
3 |
7.1 |
162 |
17 |
7.11 |
156 |
|
4 |
7.52 |
148 |
18 |
7.13 |
142 |
|
5 |
6.53 |
133 |
19 |
6.79 |
139 |
|
6 |
9.29 |
201 |
20 |
9.01 |
200 |
|
7 |
7.88 |
184 |
21 |
7.6 |
181 |
|
8 |
7.19 |
176 |
22 |
6.84 |
167 |
|
9 |
6.44 |
174 |
23 |
6.64 |
168 |
|
10 |
11.8 |
281 |
24 |
12.1 |
309 |
|
11 |
6.65 |
140 |
25 |
6.81 |
129 |
|
12 |
6.65 |
144 |
26 |
6.59 |
137 |
|
13 |
7.31 |
166 |
27 |
7.17 |
162 |
|
14 |
7.5 |
145 |
28 |
7.3 |
145 |
红字: 标准曲线范围内可检测的样品及稀释20倍后对范围外的样品进行检测
【结果】
本产品与其他公司产品R之间相关性高。另外，直接使用其他公司产品R对实际样品进行检测时，其数值会超出标准曲线范围，因此需要对所有样品进行稀释。而本产品无需稀释即可在标准曲线范围内进行检测。
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 293-96901 | LabAssay™ ATX | 150 tests | 细胞生物学用 |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 297-94601 | LabAssay™ Ammonia LabAssay™ 氨检测试剂盒 |
700 tests | 细胞生物学用 |
| 633-51021 | LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒 |
500 tests | - |
| 299-96501 | LabAssay™ HDL-Cholesterol | 100 tests | 细胞生物学用 |
| 291-96701 | LabAssay™ LDL-Cholesterol | 100 tests | 细胞生物学用 |
| 291-93901 | LabAssay (TM) Creatinine LabAssay™ 肌酐检测试剂盒 |
500 tests | 细胞生物学用 |
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