紧密连接蛋白1放免试剂盒

紧密连接蛋白1放免试剂盒说明书
CLAUDIN-1（HY-10261） RIA KIT
紧密连接蛋白（claudin）属于一个多基因家族,到目前为止,已有24种claudin成员被发现。紧密连接蛋白-1（Claudin-1）是其蛋白家族的一个成员，是一种完整的膜蛋白，分子量为23kDa,有4个疏水的跨膜区,两个细胞外环形结构和位于胞质中的羧基端、氨基端。紧密连接具有将上皮细胞联合成整体的机械作用,加强细胞间的连接,使细胞不易受破坏。炎症介质、细菌、病毒、过敏原及基因突变等原因引起claudin及其结合的蛋白结构改变,使紧密连接破坏,屏障功能受损,组织渗透性提高,导致多种疾病的发生，如过敏性疾病、遗传性疾病及先天性疾病和感染性疾病等。

紧密连接蛋白1放免试剂盒测定原理：本药盒应用放射免疫分析方法测定。根据竞争机制原理，125I-CLAUDIN-1与抗体的结合量与标准或样品中的CLAUDIN-1的含量呈一定函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分(B)与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，通过数据处理可求出样品中CLAUDIN-1的浓度值。

药盒应用：
用于骨代谢的研究

药盒组成：（常温运输，4℃保存）
1、 缓冲液（PBS）1瓶。
2、 PR分离剂（第二抗体）
3、 CLAUDIN-1抗体1瓶：用前充分摇匀
4、125I- CLAUDIN-1标记 1瓶：
5、CLAUDIN-1标准品6瓶，浓度为3.91、7.81、15.625、31.25、62.5、125pg/ml

紧密连接蛋白1放免试剂盒测定方法：本实验采用平衡法，取聚苯乙烯试管编号，按下表操作：
CLAUDIN-1 RIA加液程序 （单位： ul ）
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试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
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缓 冲 液 —— 100 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
样 品 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
125I- CLAUDIN-1 100 100 100 100 100
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摇匀4℃ 放24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀，室温15分钟， 3500 转/分 4℃离心20分钟，吸弃上清液，测定沉淀cpm数。

结果计算：
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率，以B/B0计算标准及待测样品结合百分率，在半对数坐标纸上绘制标准曲线，并查出样品值， 或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数，标准曲线及样品浓度。

紧密连接蛋白1放免试剂盒注意事项：
本月标准品每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液稀释
本月分离剂在使用前充分混匀（不可冰冻）

本试剂盒主要技术指标：
1． NSB：10%
2． 灵敏度：<20pg/ml
3． 标准曲线范围：0~6400pg/ml
4． 批内变异系数：CVw<9.3 %。
5． 批间变异系数：CVw < 10.4% 。
6． 正常参考值：各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。
7.5±3.56pg/ml(n=25)。
本次药盒参考数据：
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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xy-E13508 蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg)ELISA试剂盒 Butterfly puparum vitellogenin (vtg) ELISA kit
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xy-E13512 植物血凝素（PHA ）ELISA试剂盒 Phytohemagglutinin (PHA) ELISA kit
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xy-E13514 植物凝脂酸（PA ）ELISA试剂盒 Plants creamy acid (PA) ELISA kit
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xy-E13532 植物维生素D2(VD2)ELISA试剂盒 Plant Vitamin D2 (VD2) ELISA Kit
xy-E13533 植物维生素D3(VD3)ELISA试剂盒 Plant vitamin D3 (VD3) ELISA Kit
xy-E13534 植物维生素D(VD)ELISA试剂盒 Plant Vitamin D (VD) ELISA Kit