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A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒

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  • ¥1200 - 2400
  • EB
  • 中国/美国/德国
  • xY-10271
  • 2026年01月09日
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      CPA kit

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒说明书
    CPA(HY-10271) RIA KIT
    产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens α-toxin, CPA),是A型产气荚膜梭菌的主要毒素,又是最重要的致病因子。α 毒素是一种由370 个氨基酸组成的单链多肽。分子量为42.58KD。它也是一种依赖于锌离子的多功能性金属酶。它具有磷脂酶活性,能够水解卵磷脂形成磷酸胆碱和甘油二酯,是引起生物体组织病理变化的主要因素。它能在动物上引起坏死性肠炎、仔猪的坏死性肠炎和牛的出血性小肠炎。检测A型产气荚膜梭菌α毒素是判定食品安全和动物疾病的一个重要指标。

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒反应原理:采用竞争机制原理,标准品或样本中的CPA和加入的125I –CPA(标记的CPA抗原:产生荚膜α毒素为应用基因工程技术,以噬菌体为载体表达的产物,纯度大于98%)共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 125I –CPA(标记的CPA抗原)与抗体的结合量与标准或样品中的CPA的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂将结合部分和游离部分分离后,测定结合部分的结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中CPA的含量。
    该药盒主要应用范围:
     动物坏死性肠炎
     消化系统疾病

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒药盒组成:(常温运输,4℃保存)
    1. CPA 缓冲液1瓶
    2. CPA(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。
    3. CPA标准品6瓶,浓度为2、4、8、16、32、64、128pg/ml
    4. CPA抗体 1瓶。
    5. 125I –CPA 1瓶
    标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。
    测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作:
    CPA RIA加液程序 (单位: ul )
    ————————————————————————————
    试 剂 T NSB S0 S1~S6 样 品
    ————————————————————————————
    缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
    标 准 品 —— —— —— 100 ——
    样 品 —— —— —— —— 100
    抗 体 —— —— 100 100 100
    125I-CPA 100 100 100 100 100
    ————————————————————————————
    摇匀4℃ 放置24小时
    ————————————————————————————
    分 离 剂 —— 500 500 500 500
    ————————————————————————————
    混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。

    结果计算:
    以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。

    A型产气荚膜梭菌α毒素放免试剂盒注意事项:
    本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释
    本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释
    本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解
    本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)
    本试剂盒主要技术指标:
    1、 NSB:<7%。
    2、 灵敏度:<0.2pg/ml
    3、 标准曲线范围:2-128pg/ml
    4、 批内变异系数:CVw<7.2%;
    批间变异系数:CVw <8.9% 。
    5、 正常参考值:正常值<4 pg/ml
    阴性小于4pg/ml 阳性大于6pg/m 各实验室建立自己的正常值l
    本月药盒参考数据:
    —————————————————————————————————————————
    T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
    —————————————————————————————————————————
    CPM
    —————————————————————————————————————————
    N/T% B0/T% B/ B0 %
    —————————————————————————————————————————

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    xy-E13071 猪载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Pig apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit
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    相关实验
    • 磷脂酶 phospholipase

      把卵磷酯水解为二甘油脂和胆碱磷酸酯,最早是在产气荚膜梭菌( Clostridium perfrinsens)的α毒素中发现的,以后又在水肿梭菌( C. oedematiens),溶血梭菌( C. haemslyticum)、双酶梭菌( C. bifermentans)和蜡状芽孢杆菌( B. cereus)、蕈状芽孢杆菌( B. mycoiddes)以及铜绿假单胞菌( Pseudomonas ae- ruginosa)、荧光假单胞菌( Pseudomonas fluore- scens)的培养

    • 微生物检验:产气荚膜梭菌致病物质及所致疾病简介

      1.致病物质 产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素,有些外毒素即为胞外酶。4种主要毒素中,α毒素(卵磷脂酶)毒性最强,各菌型均能产生,在气性坏疽的形成中起主要作用。此外,很多A型菌株还能产生肠毒素,引起食物中毒。 2.所致疾病 气性坏疽、食物中毒、坏死性肠炎。

    • 产气荚膜梭菌(cl.perfringens)

      酶和 dna 酶等,构成强大的侵袭力。根据细菌产生外毒素的种类差别,可将产气荚膜梭菌分成 a 、 b 、 c 、 d 、 e5 个型。对人致病的主要是 a 型,引起气性坏疽和食物中毒。 c 型则引起坏死性肠炎。在各种毒素和酶中,以α毒素最为重要,α毒素是一种卵磷脂酶,能分解卵磷脂,人和动物的细胞膜是磷脂和蛋白质的复合物,可被卵磷脂酶所破坏,故α毒素能损伤多种细胞的细胞膜,引起溶血、组织坏死,血管内皮细胞损伤,使血管通透性增高,造成水肿。此外,θ毒素有溶血和破坏白血球的作用,胶原酶能分解

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