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- 详细信息
- 技术资料
- 灵敏度:
平均MDD为4.29 pg/mL
- 样本:
Cell culture supernates, serum, and plasma
- 标记物:
Angiopoietin like-3
- 适应物种:
Mouse
- 应用:
VAL632
- 检测方法:
定量检测天然和重组小鼠 Angiopoietin-like 3/ANGPT-L3 的浓度
- 检测范围:
62.5-4000
- 规格:
96t
Mouse Angiopoietin like-3 ELISA Kit,Valukine™
产品信息及操作手册
小鼠 Angiopoietin-like 3 /ANGPT-L3 ValukineTM ELISA 试剂盒
目录号:VAL632
适用于定量检测天然和重组小鼠 Angiopoietin-like 3/ANGPT-L3 的浓度
科研专用,不可用于临床诊断
有效期详见试剂盒包装标签
Novus 试剂盒确保在你收货日期 3 个月内有效
20
I. 背景
血管生成素样 3(Angiopoietin-like 3, ANGPT-L3)是一种分泌型糖蛋白,在脂肪酸代
谢中发挥着重要作用。它是与血管生成素具有结构相似性的几个分子之一,血管生成素
也包含 N 末端盘绕的卷曲螺旋结构域和 C 末端纤维蛋白原样结构域(1-4)。小鼠
ANGPT-L3 与小鼠 ANGPT-L1、2、4 有 22%-30%的氨基酸(amino acid, aa)序列相
同性。它与人 ANGPT-L3 有 77%的氨基酸序列相同性。ANGPT-L3 从发育初期到成年
期在肝脏中表达(5, 6)。它有 70 kDa、50 kDa 和 32 kDa 三种形态,在体外可形成弱
相关的非共价多聚体(6)。ANGPT-L3 可直接抑制脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase, LPL)
和内皮脂肪酶,这些酶负责水解循环中的甘油三酯和 HDL 磷脂(7, 8)。这种活性需要
一个假定的肝素结合基团,该基团位于卷曲螺旋结构域的 N 端(9)。
ANGPT-L3 通过前蛋白转化酶在肝脏种蛋白分解裂解(10)。全长 ANGPT-L3 在血浆
中循环,分离出的 N 端和 C 端片段分别含有卷曲螺旋结构域和纤维蛋白原样结构域(9)。
裂解可激活 ANGPT-L3,因为释放的 N 端片段在增加血浆甘油三酯和抑制内皮脂肪酶
时比全长 ANGPT-L3 更有效(9, 10)。ANGPT-L3 不与血管生成素受体 Tie-1 或 Tie-2
结合,但其纤维蛋白原样结构域与整合素αVβ3 相互作用,诱导内皮细胞粘附、迁移和
新生血管形成(11)。ANGPT-L3 还能促进造血干细胞的扩增(12)。
ANGPT-L3 可促进循环中甘油三酯水平的增加,但不会改 VLDL 或 HDL 的分泌或吸收
(7, 9, 13)。ANGPT-L3 基因敲除小鼠血脂偏低,LPL 活性升高(14)。肝 X 受体(liver
X receptor, LXR)激动剂上调体内 ANGPT-L3 的表达,而受胰岛素、瘦素和甲状腺激
素受体 beta(thyroid hormone receptor beta, TRβ)激动剂或过氧化物酶体增殖激活
受体 beta(peroxisome proliferator-activated receptor beta, PPARβ)激动剂下调体内
ANGPT-L3 的表达(15-18)。ANGPT-L3 表达失调和血浆甘油三酯水平升高是肥胖和
糖尿病小鼠某些品系的特征(7, 13, 16)。在人体中,血清 ANGPT-L3 水平与血清 HDL-
胆固醇和脂联素水平以及动脉内膜厚度呈正相关,而动脉内膜厚度是动脉粥样硬化进展
的指标(19, 20)。
I. 背景
血管生成素样 3(Angiopoietin-like 3, ANGPT-L3)是一种分泌型糖蛋白,在脂肪酸代
谢中发挥着重要作用。它是与血管生成素具有结构相似性的几个分子之一,血管生成素
也包含 N 末端盘绕的卷曲螺旋结构域和 C 末端纤维蛋白原样结构域(1-4)。小鼠
ANGPT-L3 与小鼠 ANGPT-L1、2、4 有 22%-30%的氨基酸(amino acid, aa)序列相
同性。它与人 ANGPT-L3 有 77%的氨基酸序列相同性。ANGPT-L3 从发育初期到成年
期在肝脏中表达(5, 6)。它有 70 kDa、50 kDa 和 32 kDa 三种形态,在体外可形成弱
相关的非共价多聚体(6)。ANGPT-L3 可直接抑制脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase, LPL)
和内皮脂肪酶,这些酶负责水解循环中的甘油三酯和 HDL 磷脂(7, 8)。这种活性需要
一个假定的肝素结合基团,该基团位于卷曲螺旋结构域的 N 端(9)。
ANGPT-L3 通过前蛋白转化酶在肝脏种蛋白分解裂解(10)。全长 ANGPT-L3 在血浆
中循环,分离出的 N 端和 C 端片段分别含有卷曲螺旋结构域和纤维蛋白原样结构域(9)。
裂解可激活 ANGPT-L3,因为释放的 N 端片段在增加血浆甘油三酯和抑制内皮脂肪酶
时比全长 ANGPT-L3 更有效(9, 10)。ANGPT-L3 不与血管生成素受体 Tie-1 或 Tie-2
结合,但其纤维蛋白原样结构域与整合素αVβ3 相互作用,诱导内皮细胞粘附、迁移和
新生血管形成(11)。ANGPT-L3 还能促进造血干细胞的扩增(12)。
ANGPT-L3 可促进循环中甘油三酯水平的增加,但不会改 VLDL 或 HDL 的分泌或吸收
(7, 9, 13)。ANGPT-L3 基因敲除小鼠血脂偏低,LPL 活性升高(14)。肝 X 受体(liver
X receptor, LXR)激动剂上调体内 ANGPT-L3 的表达,而受胰岛素、瘦素和甲状腺激
素受体 beta(thyroid hormone receptor beta, TRβ)激动剂或过氧化物酶体增殖激活
受体 beta(peroxisome proliferator-activated receptor beta, PPARβ)激动剂下调体内
ANGPT-L3 的表达(15-18)。ANGPT-L3 表达失调和血浆甘油三酯水平升高是肥胖和
糖尿病小鼠某些品系的特征(7, 13, 16)。在人体中,血清 ANGPT-L3 水平与血清 HDL-
胆固醇和脂联素水平以及动脉内膜厚度呈正相关,而动脉内膜厚度是动脉粥样硬化进展
的指标(19, 20)。
II. 概述
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠Angiopoietin-like 3抗体包被于微孔板上,
样品,质控品和标准品中的小鼠Angiopoietin-like 3会与固定在板上的抗体结合,游离的
成分被洗去;加入辣根过氧化酶标记的抗小鼠Angiopoietin-like 3检测抗体进行孵育。洗
涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物溶液(显色剂)。溶液颜色与结合目标蛋白成正
比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本,小鼠血浆样本和小鼠血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用标准品稀释液(1×)稀释后重新检测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
A. 检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠Angiopoietin-like 3抗体包被于微孔板上,
样品,质控品和标准品中的小鼠Angiopoietin-like 3会与固定在板上的抗体结合,游离的
成分被洗去;加入辣根过氧化酶标记的抗小鼠Angiopoietin-like 3检测抗体进行孵育。洗
涤去除未结合的试剂后,加入TMB底物溶液(显色剂)。溶液颜色与结合目标蛋白成正
比;加入终止液;用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
仅供科研使用,不可用于体外诊断;
该试剂盒适用于细胞培养上清样本,小鼠血浆样本和小鼠血清样本;
请在试剂盒有效期内使用;
不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用;
样本值若大于标准曲线的最高值,应将样本用标准品稀释液(1×)稀释后重新检测;
检测结果的不同可由多种因素引起,包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗
板技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等。
C. 灵敏度
52次检测结果表明,小鼠Angiopoietin-like 3的最低可测剂量(MDD)范围为1.64- 9.62
pg/mL。平均MDD为4.29 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
该免疫测定法以R&D Systems生产的高纯度的Sf21表达的重组小鼠Angiopoietin-like 3
校正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的小鼠Angiopoietin-like 3,然后用标准品稀释液(1×)
将样本稀释到检测范围内,测定其线性。G. 特异性
此ELISA法可检测天然及重组小鼠Angiopoietin-like 3。
将以下因子用标准品稀释液(1×)配制成50 ng/mL的浓度来检测与小鼠Angiopoietin-like
3的交叉反应。将50 ng/mL的干扰因子掺入中间范围的重组小鼠Angiopoietin-like 3对照
品中,来检测对小鼠Angiopoietin-like 3的干扰。没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant mouse: Recombinant human:
Angiopoietin-3 Angiopoietin-like 3 (aa 17-460)
Angiopoietin-like 2 Angiopoietin-like 3 (aa 17-220)
Angiopoietin-like 4 LPL (aa 28-154)
Angiopoietin-like 7
本试剂盒不能检测大鼠血清样本。
本试剂盒能检测全长和27 kDa的N端剪切小鼠Angiopoietin-like 3,但不检测38 kDa C
端剪切片段。
52次检测结果表明,小鼠Angiopoietin-like 3的最低可测剂量(MDD)范围为1.64- 9.62
pg/mL。平均MDD为4.29 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对
应浓度。
D. 校正
该免疫测定法以R&D Systems生产的高纯度的Sf21表达的重组小鼠Angiopoietin-like 3
校正。
E. 线性
不同的样本中含有或掺入高浓度的小鼠Angiopoietin-like 3,然后用标准品稀释液(1×)
将样本稀释到检测范围内,测定其线性。G. 特异性
此ELISA法可检测天然及重组小鼠Angiopoietin-like 3。
将以下因子用标准品稀释液(1×)配制成50 ng/mL的浓度来检测与小鼠Angiopoietin-like
3的交叉反应。将50 ng/mL的干扰因子掺入中间范围的重组小鼠Angiopoietin-like 3对照
品中,来检测对小鼠Angiopoietin-like 3的干扰。没有观察到明显的交叉反应或干扰。
Recombinant mouse: Recombinant human:
Angiopoietin-3 Angiopoietin-like 3 (aa 17-460)
Angiopoietin-like 2 Angiopoietin-like 3 (aa 17-220)
Angiopoietin-like 4 LPL (aa 28-154)
Angiopoietin-like 7
本试剂盒不能检测大鼠血清样本。
本试剂盒能检测全长和27 kDa的N端剪切小鼠Angiopoietin-like 3,但不检测38 kDa C
端剪切片段。
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