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iFluor 488标记鬼笔环肽(绿色) iFluor 48

8 phalloidin
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  • 上海
  • 40736ES75
  • 2026年03月12日
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      iFluor 488 phalloidin

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      翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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      -20℃避光干燥保存

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      300T

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    iFluor 488 phalloidin iFluor™ 488标记鬼笔环肽(绿色)

    40736ES75

    300 T

    液体

    -20℃避光保存

    2126.00

    1853.00


    背景描述
    鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片、细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
    鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
    本品为iFluorTM 488标记的鬼笔环肽,可发出高亮度、光稳定的绿色荧光,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。iFluorTM 488 鬼笔环肽染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、Qdot® 纳米晶体和其他iFluorTM偶联物(包含iFluorTM偶联二抗)。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。
    本品以1000×储存液形式(溶于DMSO)提供。
    产品性质
    产品细节图片1
    分子量(Molecular Weight ~1900
    最大激发/发射波长(Ex/Em 493/517nm
    溶解性(Solubility 溶于DMSO
    结构式(Structure 产品细节图片2
    运输与保存方法
    冰袋运输。收到货后-20℃避光干燥保存,1年有效。
    注意事项
    1. 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量LD50约2mg/kg)。
    2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    需要自备材料
    1. 1×PBS缓冲液, pH 7.4, 细胞培养级别(货号:60145ES76)
    2. 固定液4%Paraform|aldehyde(不含甲醇)(溶于PBS缓冲液)(货号:36314ES60)
    3. 透化液Triton X-100(溶于PBS缓冲液)
    4. BSA,标准级别(货号:36101ES25)
    5. DAPI染液(即用型)(货号:40728ES50)
    操作步骤
    1. 1×工作液准备
    吸取1µl 1000×iFluorTM 488标记鬼笔环肽(溶于DMSO)到1ml 含有1%BSA的PBS缓冲液中即可得到1×工作液。
    注:1)使用前需将1000×DMSO iFluorTM 488鬼笔环肽储存液分装并于-20℃避光干燥保存。
    2)不同的细胞染色情况不同,相应iFluorTM 488鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。
    1. 染色步骤
    1. 细胞培养过夜或更长,使其密度达到50-60%汇合度。
    2. 吸掉培养液,37℃预热的1×PBS(pH 7.4)清洗细胞2次。
    3. 使用溶于PBS的4% Formaldehyde Solution 进行细胞固定,室温固定10-30min。
    4. 避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
    5. 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。
    6. (可选):室温条件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化处理3-5min,从而增加其通透性。
    7. 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。
    8. 取足够量新鲜配好的 iFluorTM 488标记鬼笔环肽工作液以覆盖住细胞,如:100µl/孔(96孔板),室温避光染色20-90min。
    9. 用PBS清洗细胞3次,每次5min。
    10. (可选):加入足量的即用型DAPI溶液对细胞核进行复染,如:100µl/孔(96孔板),室温3~5min。用PBS清洗细胞2次,每次5min。
    11. 于荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择iFluorTM 488激发/发射滤片(Ex/Em=493/517nm)和/或DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。

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    [1] Wang C, Tu J, Zhang S, et al. Different regions of synaptic vesicle membrane regulate VAMP2 conformation for the SNARE assembly. Nat Commun. 2020;11(1):1531. Published 2020 Mar 24. doi:10.1038/s41467-020-15270-4(IF:12.121)
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