荧光法谷氨酸检测试剂盒 *红色荧光*

Amplite 荧光法谷氨酸检测试剂盒 红色荧光

货号	10054	存储条件	f/l
规格	200 Tests
Ex (nm)	571	Em (nm)	585
分子量		溶剂

产品介绍

谷氨酸作为20种蛋白质氨基酸之一，其羧酸阴离子及盐类被称为谷氨酸盐。在神经系统中，谷氨酸作为一种重要的神经递质，不仅参与长时程增强效应的形成，更对学习记忆功能具有关键调节作用。值得注意的是，谷氨酸虽是γ-氨基丁酸（GABA）的前体物质，但两者在功能上却表现出显著的拮抗效应。近年研究发现，谷氨酸对维持心脏和前列腺的正常生理功能可能具有重要作用。作为少数能透过血脑屏障的营养物质之一，谷氨酸在多种神经系统疾病的治疗中展现出应用价值，包括：抑郁症、注意力缺陷障碍（ADD/ADHD）、慢性疲劳综合征、酒精依赖症、癫痫、肌营养不良、智力发育迟缓以及精神分裂症等疾病的辅助治疗。

Amplite®荧光法谷氨酸检测试剂盒为各类生物样本中的谷氨酸测定提供了快速灵敏的解决方案。该检测体系通过偶联酶系统催化L-谷氨酸与NADP反应生成NADPH，经特异性NADPH传感器识别后循环再生为NADP，在此过程中产生红色荧光产物。检测结果既可通过荧光酶标仪读取，也可使用吸光度酶标仪进行测定。

本试剂盒在100 µL反应体系中可检测低至10 µM的谷氨酸浓度。该检测方法稳定性优异，可广泛应用于各类需要谷氨酸定量分析的科研及临床检测场景。

产品优势

100 µL反应体系中可检测低至10 µM的谷氨酸浓度

产品说明书

96孔板测定示例

概述

制备谷氨酸测定混合物（50μL）

加入谷氨酸标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育30分钟 - 2小时监测荧光增加，Ex / Em = 540/590 nm

 

操作方法

1.准备NADP储备液（200X）：

将100μL稀释缓冲液（组分E）加入到NADP（组分C）的小瓶中以制备200X NADP储备溶液。

注意：未使用的NADP储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

2.准备谷氨酸储备液：

将200μL稀释缓冲液（组分E）加入小瓶谷氨酸（组分D）中以制备100mM谷氨酸储备溶液。

注意：未使用的谷氨酸储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存于-20℃。

 

3.准备谷氨酸测定混合物：

3.1将10 mL测定缓冲液（组分B）加入酶混合物瓶（组分A）中。

3.2将50μL200XNADP储备液（来自步骤1）加入酶混合物瓶（来自步骤3.1），并充分混合。

注意：这种谷氨酸测定混合物足以用于两个96孔板。 未使用的谷氨酸测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

4.准备连续稀释的谷氨酸标准品（0至1 mM）：

4.1将10μL谷氨酸储备溶液（来自步骤2）加入990L稀释缓冲液（组分E）中以产生1mM谷氨酸标准溶液。

注意：稀释的谷氨酸标准溶液不稳定。 在4小时内使用。

4.2取200μL的1mM谷氨酸标准溶液进行1：3连续稀释，得到300,100,30,10,3,1和0μM连续稀释的谷氨酸标准品。

4.3如说明书中表1和2所述，将连续稀释的谷氨酸标准品和含有谷氨酸的测试样品加入到96孔微量培养板中。

 

5.运行谷氨酸测定：

5.1将50μL谷氨酸测定混合物（来自步骤3）添加到谷氨酸标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤4.3）以使总谷氨酸测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL谷氨酸测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时，避光。

5.3通过在Ex / Em = 530-570 / 590-600nm（最佳Ex / Em = 540 / 590nm）下使用荧光板读数器监测荧光增加。

注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。