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一年以上
- 英文名:
dNTP Mixture takara4030
- 库存:
现货
- 供应商:
武汉科昊佳生物科技有限公司
- CAS号:
******
- 保存条件:
-20°C
- 规格:
各3.2 μmol/1.28 ml
| 特点 |
| 可作为DNA聚合酶的底物使用。 ◇ 是单品销售的dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔混和液。 ◇ PCR反应时,不用稀释可直接使用。 ◇ 4030用于普通PCR反应时的标准使用量为每50 μl 反应体系使用4 μl (终浓度200 μM)。 ◇ 4019系列是按RT-PCR反应要求配制的,特别适用于RT-PCR反应体系,此时的标准使用量为每20 μl 反应体系使用1 ~ 2 μl (终浓度500 ~ 1,000 μM)。 |
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文献和实验作用。而T4 DNA Polymerase即使掺入了dNTP〔αS〕也会切除掉。 ↑TOP Q-4: Klenow用于DNA末端的修复后,连接效率并不好,为什么? A-4: Klenow补平3’ -末端后,一般多加一个碱基。突出末端通过3’ -Exonuclease活性可以去除,但由于效率低,只能使50%左右的DNA末端平滑化。为了使DNA末端完全平滑化,建议使用T4 DNA Polymerase或者DNA Blunting Kit (TaKaRa
我要检测一个受体蛋白,提取的脑组织,Trizol提取组织RNA,加异丙醇离心后能见到明显的沉淀,按照TakaRa 的RNA LA PCR KIT(AMV) VER.1.1说明书操作,在逆转录后PCR不再加dNTP。逆转录后PCR用actin引物能模糊扩出一些东西,但有两条以上的带(第二次都快扩成100bpMARKER了!)。目的片段干干净净什么都没有!目的片断的引物一个是外国文献上的,一个 是自己设计的,都没有扩出来。 小弟还菜,想大家给点建议,体系、PCR过程、胶图如下: 逆转
的退火(复性):模板 DNA 经加热变性成单链后,温度降至55℃ 左右,引物与模板 DNA 单链的互补序列配对结合; 3. 引物的延伸:DNA 模板-引物结合物在 Taq DNA 聚合酶的作用下,以 dNTP 为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性、退火、延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟, 2~3 小时就能将待扩增的目的基因扩增放大几百万倍。 典型
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