牛奶过敏原ELISA试剂盒96 Tests -上海甄准

牛奶过敏原ELISA试剂盒96 Tests -上海甄准

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  • 2025年07月15日
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    牛奶过敏原ELISA试剂盒96 Tests -上海甄准

    牛奶属于最重要的致敏食物成分,尤其是儿童。非常低量牛乳可引起过敏性反应,严重会导致过敏性休克。因此,牛奶过敏的人必须严格避免牛奶或含奶食品。特别是隐藏的牛奶蛋白质的食品,如香肠,饼干,方便食品或饮料对牛奶过敏的人而言是一个关键问题。根据欧盟指令2003/89/EG加牛奶的食品必须贴上标签。对于食品中牛奶的检测是必需的。

    牛奶中约80%的牛奶蛋白质是酪蛋白。β-乳球蛋白是乳清中主要过敏原,占总蛋白质的10%。

    检测样品:

    上海甄准生物提供牛奶ELISA试剂盒根据NIST1549,用于牛奶蛋白质高灵敏度的检测系统。该试剂盒同样能够定量检测和验证食品中的残留酪蛋白和β-乳球蛋白,如饼干,面包屑,香肠,橙汁,红酒,豆制品和巧克力。

    产品特点:

    灵敏度(牛奶蛋白):0.05ppm

    回收率:79-122%

    培育时间:60min

    订购信息:

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    规格

    ZZKMIL-E01

    牛奶过敏原ELISA试剂盒

    Milk Allergens ELISA Kit

    96 Tests

    检测原理:

    上海甄准生物提供的牛奶过敏原检测试剂盒是酶联免疫检测方法。混合抗体包被在微孔板的表面。牛奶蛋白含有样品或标准品加到微孔板的孔中。在室温下培养20分钟后,稀溶液洗涤将微孔板除去未结合的物质。将过氧化物酶偶联的第二混合抗体加入孔中,培育20分钟后,再次清洗微孔板。加入底物溶液并培育20分钟,直到变蓝色。加入终止液抑制显色反应,颜色变为黄色。在450nm处检测黄色吸光度。牛奶蛋白的浓度与测试样品的颜色强度直接成比例。

    盒子包含试剂:

    试剂盒使用96次。储存在2-8°C

    112*8微孔板,包被牛奶蛋白的抗体。

    2、牛奶蛋白标准品(0, 0.4, 1, 4, 10 ppm) 根据NIST RM 15495 vials ,每瓶1.0m100x浓缩液,蓝色。稀释20ul标准品到19820ul预稀释的提取液和样品稀释缓冲液得到上述浓度。保存在4°C,稀释标准品溶液可以保存至少24h

    3、抗牛奶蛋白过氧物酶共轭物:15ml,红色,即用型。

    4、底物溶液(TMB)15ml即用型。

    5、终止液(0.5 M H2SO4): 15 mL即用型。

    6、样品提取和稀释缓冲液(碳酸盐): 2 x 120 mL 10x浓缩液,红色。稀释1+4蒸馏水。稀释液保存在4°C,至少可保存1周。如果冷藏结晶过程中沉淀,浓缩物应加热至3715分钟。

    7、洗涤液(PBS + Tween 20): 60 mL 10x浓缩液。稀释1+9蒸馏水。稀释液保存在4°C,至少可保存1周。如果冷藏结晶过程中沉淀,浓缩物应加热至3715分钟。

    9、塑料袋储存未使用微孔板。

    10、操作手册。

    示例标准值:

    下表是示例的典型的标准曲线。计算值是10ppm标准品的吸光度。这些值仅是示例。

    牛奶蛋白 (ppm)

    % binding of 10ppm

    10

    100

    6

    86

    1

    50

    0.4

    32

    0

    9

    性能参数:

    1、灵敏度

    检测限 (LOD)0.05ppm.

    最低定量限 (LOQ) 0.4ppm

    由于样品基质多样性和空白影响,结果低于LODLOQ,认为阴性的

    2、精确度

    内部分析精确度

    8-10%

    互分析精确度

    10-17%

    3、线性度

    样品稀释线性度80% - 130%

    References

    1. De Luis R, et al. (2007) – Development of two immunoassay formats to detect ß-lactoglobulin. J of Food Protection, 70(7):1691-97

    2. Restani P, et al. (1999) – Cross-reactivity between milk proteins from different animal species. Clin Exp Allergy,29(7):997-1004

    3. Mäkinen-Kiljunen S, et al. (1992) – A sensitive enzyme-linked immunosorbent assay for determination of bovine beta-lactoglobulin. Allergy, 47(4):347-52

    4. Hefle SL, et al. (2004) – Validated sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for casein and its application to retail milk-allergic complaint foods. J Food Prot, 67(9):1933-38

    5. Patrick W, et al. (2009) – Determination of the bovine food allergen casein in white wines by quantitative indirect ELISA, SDS-Page, Western blot and immunostaining. J Agric Food Chem, 57(18):8399-405

    6. Watanabe H et al. (2005) - Study on detection of allergenic substances (egg and milk) in processed meat products and frozen foods. Sho Eis Zas, 46(4):139-47

    7. Downs ML, Taylor SL (2010) – Effects of thermal processing on the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) detection of milk residues in a model food matrix. J Agric Food Chem, 58(18):10085-91

    8. De Luis R, et al. (2007) – Development of two immunoassay formats to detect ß-lactoglobulin: influence of heat treatment on ß-lactoglobulin immunoreactivity. J Food Prot, 70(7):1691-7

    9. Abbott M, et al. (2010) – Validation procedures for quantitative food allergen ELISA methods: community guidance and best practices. J AOAC Int, 93(2):442-50

    10. Levin ME, et al. (2005) – Anaphylaxis in a amilk-allergic child after ingestion of soy formula cross contaminated with cow’s milk protein. Pediatrics, 116(5):1223-5

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