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- 英文名:
HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)
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大量
- 供应商:
南京诺唯赞生物科技有限公司
- 规格:
100 rxns (20 μl/rxn)
HiScript II Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)
预混液形式的高效的第二代qPCR专用逆转录试剂(去基因组)

第一链cDNA合成;逆转录(含gDNA去除);基因表达分析;两步法qRT-PCR检测

· 可靠的逆转录效率:高效的HiScript II Reverse Transcriptase具有较强的温度耐受能力,确保在高温条件下能打开RNA 复杂二级结构,得到更长的cDNA
· cDNA合成效率高:Anchored Oligo (dT) 23 VN 设计独特,确保反应特异性,提高第一链cDNA 合成效率和成功率
· 简便快捷的操作:即用型SuperMix 预混液使用方便省时
· 带有基因组去除模块:可有效清除高达500 ng基因组DNA




以HeLa 细胞RNA 为模板,使用Vazyme #R223 和Supplier Ta、Supplier Tg 同类产品,在各自说明书所提供的反应体系及反应条件下进行逆转录,然后用qPCR 检测基因ACTB 和CBR3。结果表明与同类产品相比,Vazyme #R223 在扩增效率和扩增线性上表现都较优异。

本产品是以高性价比的HiScript II Reverse Transcriptase 为基础的两步法qPCR 试剂盒。试剂盒中的4× gDNA wiper Mix可去除残留的基因组DNA,确保了后续定量结果的可靠。5×SuperMix 包含有逆转录反应所需的所有组分,只需加入模板RNA和水即可迅速进行反应,同时终止gDNA wiper作用,保证cDNA的完整性。本产品针对qPCR进行特别优化,逆转录产物兼容SYBR Green染料法和探针qPCR,可以根据实验目的,选择相应的试剂配合使用,进行高性能的基因表达分析。



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文献和实验大家一臂之力,里面包含单独成管的 Oligo (dT)20VN 及 Random hexamers,可以根据模板类型和后续实验需求灵活选择或按比例混和;还有 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)(R323),包含逆转录反应所需的所有组分,当然 Random primers 和 Oligo (dT)20VN 的混合引物也直接在这管 SuperMix 中,只需加入模板 RNA,20 min 内即可完成逆转录反应,极为方便! 第三个选择就是基因
。此外,QIAGEN还提供专门用于Rotor-Gene Q的 Rotor-Gene Multiplex PCR和RT-PCR Kit。所有这些试剂盒都是为基因表达分析设计的,能同时检测最多4个目标,用在两步法和一步法RT-qPCR中。这些试剂盒特别适合低丰度的转录本,能检测低至10个拷贝。 如何提高成功率 建立多重反应的步骤如下:1)优化引物和探针序列,2)选择标记探针的报告基因和淬灭基因,3)优化单重实验,4)验证多重实验,5)必要时,优化多重实验。在开始多重PCR前,需要记住几件
样。比如 Yeasen 的荧光定量酶就分为配体法热启动酶和抗体法热启动酶,关于这两种酶反应条件的设定需要注意以下几点:1、设置程序时要注意配体法的预变性为 95℃,5 min;抗体法的预变性为 95℃,30s。;2、选择两步法,可保证产物高特异,选择三步法可保证高效率扩增,小伙伴可根据自己的实验选择合适的程序;3、上机时尽量避免使用最外面一圈的孔。以上就是小编对 RT-qPCR 注意事项的详细总结,希望能够对大家的实验有所帮助。












