- ￥4770
- Pierce
- 88804
- 88804
- 2025年12月25日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
Pierce经典磁珠法 IP/Co-IP试剂盒
- 英文名：
Pierce经典磁珠法 IP/Co-IP试剂盒
- 库存：
4
- 供应商：
研卉生物
- 保存条件：
2-8°
- 规格：
50 次反应
Pierce经典磁珠法 IP/Co-IP试剂盒
Thermo Scientific Pierce 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒使用不到 10 μg 的抗体和磁性分离器可高度有效且高效地对抗原和蛋白复合物进行免疫沉淀 (IP) 和免疫共沉淀 (co-IP)。
经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒的特点：
•兼容—基于蛋白 A/G 重组蛋白的磁珠可确保与大多数一抗（无论来自小鼠还是兔）兼容
• 快速—免疫沉淀短至 30 分钟，以降低背景并提高瞬时蛋白复合物的捕获水平
• 洁净—固定您的抗体，以防止洗脱液受到污染
• 耐受性—在存在去污剂、低 pH 值缓冲液或常见质谱溶剂的情况下，不会浸出蛋白 A/G
• 高效—与其他磁珠相比，使用一半推荐体积的磁粒子进行免疫沉淀
• 便利—综合 Co-IP 试剂盒包含磁珠和完整免疫沉淀实验所需的所有必要缓冲液
本免疫沉淀试剂盒使用高质量 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠以及优化的缓冲液和灵活的实验方案以获得高得率 IP 或 co-IP，其可使用手动或自动磁性分离工具。优化的裂解/洗涤缓冲液优化了抗体-抗原的得率和高效结合以及 co-IP 相互作用。相对温和的低 pH 值洗脱缓冲液可使结合的免疫复合物与蛋白 A/G 分离。或者，内含的泳道标志物样品缓冲液提供了快速的变性洗脱，用于 IP 产物的直接 SDS-PAGE 分析。
包括：
Pierce 蛋白 A/G 磁珠、裂解/洗涤缓冲液、洗脱缓冲液、中和缓冲液及上样缓冲液
使用磁粒子进行免疫沉淀与微珠状琼脂糖 IP 非常相似，只是使用磁铁而非通过离心进行分离。首先将特异性抗体加入到样品中，形成一种免疫复合物，然后与磁珠结合。洗涤复合物以去除未结合的材料，低 pH 值洗脱缓冲液可使结合的免疫复合物与蛋白 A/G 分离。或者，包括泳道标志物样品缓冲液，用于使用变性条件进行解离或者用于 SDS-PAGE 分析的下游样品制备。该试剂盒包含 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠（用于快速方便地对抗原进行磁性分离）以及优化的缓冲液（用于提高抗原得率）。使用磁力架手动从溶液中取出磁珠或者使用 Thermo Scientific KingFisher Flex 仪器等仪器通过自动化操作从溶液中取出磁珠。
通常已知更长时间的抗体-样品孵育（2 小时到过夜）通常在 IP 测定中具有更高的得率。人们通常认为这种更高的得率与增加的背景有关。我们的研究人员发现过夜抗体-样品结合然后使用 Pierce 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒进行免疫沉淀，通常会提高得率，但不会增加背景。因此，我们建议研究人员尽可能在至少 1 个小时内执行该结合步骤。
方案总结：
- 使用选择的 IP 抗体将细胞裂解物在室温 (RT) 下孵育 1 至 2 小时或在 4°C 下过夜孵育。
- 使抗原-抗体复合物与蛋白 A/G 磁珠在 RT 下结合 1 小时。
- 使用 IP 裂解/洗涤缓冲液洗涤微珠两次，并用纯化水洗涤一次。
- 洗脱抗原/抗体复合物。
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文献和实验或者互作蛋白复合物（红色+黄色）洗脱 Step 5：分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验，先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照：证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白（IP）或者互作蛋白对（co-IP，比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y），即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照：用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了，固然是值得高兴
magichunter 目前我想证明某个药物分子抑制了蛋白A和蛋白B之间的相互作用，初步打算用Co-IP的方法验证加药前后两个蛋白的相互作用情况，请问有没有其他的办法也可以证明这个设想呢？ aberrant 如果有A、B两个蛋白的荧光质粒可以做一下FRET，目前为止，Co-IP和FRET是最直接的方式，前者量化后者直观 shylook 首先做下IP 是比较直接和成本合适的实验
rendangli NF-KB与IL-8 promter区域可以结合，荧光素酶报告基因已经验证了，他们之间还有没有可能存在其他作用方式 ylhuang0502 1. Co-IP to test they can physically associate/bind. 2. If you can get positive data from #1 experiment, you may try NF
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