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- ProSpec
- HOR-303
- Serumwerk Bernburg AG
- 2025年10月04日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
Polymorphprep
- 库存：
人外周血中单个核细胞和粒细胞分离液Polymorphprep
- 英文名：
Polymorphprep
- 规格：
250ml
Serumwerk Bernburg AG细胞分离液
PolymorphPrep分离液（即用型）
PolymorphPrep是一种即用型、无菌、内毒素含量很低的分离人外周血中多形核粒细胞（polymorphonuclear granulocytes）的分离液。
分离原理：
Polymorphprep分离液的高渗透压可使红细胞失水而缩小，从而增大红细胞的有效浮力密度；分离液中的右旋糖苷能使红细胞聚集并在溶液中快速沉降，随着离心过程红细胞的逐渐沉降，Polymorphprep分离液也形成连续梯度，这样只要离心力和离心时间选择合适，即可将多叶核白细胞停留于分离液中，而红细胞沉降在分离液底部，并且单个核细胞（PBMC）仍就停留于分离液和血液的界面，从而达到同时分离获得多叶核白细胞和单个核细胞的效果。
注意事项：
- 该分离液仅适用于人的未作稀释的血液，不适用于动物。
- 待分离血液和待用分离液的温度需要保持在18度-22度之间，因为温度的变化会影响分离液的密度和粘度，从而影响分离效果。
- 分离液的保存应置于无菌环境，并避光保存。
相关技术参数：
成分：泛影葡胺钠（Sodium diatrizoate）：13.8%（w/v）；
右旋糖苷500（Dextran 500）：8.0%（w/v）
密度（Density）：1.113±0.001g/ml
渗透压(Osmolality)：445±15mOsm
内毒素含量（Endotoxins）：<1.0EU/ml
分离所得多叶核白细胞中红细胞的含量：整个细胞数目的2-6%。
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文献和实验人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
正常人外周血中的干/祖细胞的含量占有核细胞数的1%左右，经有效动员后，骨髓中的造血干细胞会释放到外周血中，使外周血中的干/祖细胞比例明显增高。动员外周血是指用有效的动员剂对供者进行动员后采集的外周血。重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）是外周血动员最常用的动员剂，它可选择性的作用于粒系造血祖细胞，促进其增殖、分化，并可增加外周血中性粒细胞的数目和功能。动员外周血单个核细胞是采集经动员后的健康供者的外周血，采用密度梯度离心的方法提取其单个核细胞，其各亚型细胞的数量、细胞免疫表型、分泌
g/mL，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。 人 PBMC 中不同细胞类型的比例 PBMC 中大部分都是淋巴细胞，包括 B 细胞和 T 细胞，其中 CD3 T 细胞又占了淋巴细胞中绝大部分 (45 - 70%)。这些 T 细胞都处于初始（naive）状态，即已经成熟了但没有受到抗原
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