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- AAT Bioquest
- L乳酸检测试剂盒。比色测定
- 13815
- 2025年08月09日
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- 英文名：
L-Lactate Colorimetric/ Assay Kit
- 库存：
1
- 供应商：
L乳酸检测试剂盒。比色测定
- 规格：
200T
Amplite 比色法L-乳酸检测试剂盒
货号;13815
Amplite 比色法L-乳酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乳酸的试剂盒，乳酸是手性的并且具有两种光学异构体：L-乳酸和D-乳酸。在代谢和运动过程中，乳酸盐通过乳酸脱氢酶（LDH）不断从丙 酮酸产生。 监测乳酸水平是评估组织需氧量和利用率之间平衡的好方法，在研究细胞和动物生理学时非常有用。D-乳酸不被哺乳动物代谢，其从体内主要取决于肾脏排泄。D-和L-乳酸存在于许多发酵乳制品中，例如酸奶和奶酪，以及腌制蔬菜，腌制肉类和鱼类。D-和L-乳酸含量是食品的质量指标，如鸡蛋，牛奶，果汁和葡萄酒。血液中异常高浓度的D-乳酸通常是胃肠道中过度生长的反映。
AAT Bioquest的Amplite 乳酸盐检测试剂盒（L＃乳酸检测Cat＃13814和13815，D-lactate检测Cat＃13810和13811）提供荧光和吸光度检测方法，用于检测L-乳酸盐或D-乳酸盐。生物样品，如血清，血浆，尿液，以及细胞培养样品。在酶偶联测定中，乳酸与NADH成比例相关，其通过生色NADH传感器特异性监测。通过吸光度酶标仪在~575nm或~55075nm / A605nm的吸光度比下可以容易地读取信号，以提高测定灵敏度。使用此Colorimetric Amplite L-乳酸测定试剂盒，我们能够在100μL反应体积中检测到低至4μM的L-乳酸。它应用广泛，可以很容易地适用于需要测量L-乳酸的各种应用。
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收: | 575/605nm |
| 推荐孔板: | 透明底板 |
96孔板测定示例
概述
制备L-乳酸测定混合物（50μL）
加入L-乳酸标准品或测试样品（50μL）
在室温下孵育30分钟~2小时
监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加
注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。
操作方法
1.准备NAD储备溶液（100X）：
向NAD小瓶（组分C）中加入100μLH2O，制成100×NAD储备溶液。
2.准备L-乳酸盐储备液：
将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入L-乳酸盐标准品（组分D）的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。
注意：未使用的L-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。
3.准备L-乳酸标准品（0至1 mM）的连续稀释液：
3.1将10μLL-乳酸盐储备液（来自步骤2）加入990L PBS缓冲液中，以产生1mM L-乳酸盐标准溶液。
注意：稀释的L-乳酸标准溶液不稳定，应在4小时内使用。
3.2取200μL的1mM L-乳酸标准溶液进行1：3连续稀释，得到L-Lactate标准品的300,100,30,10,3,1和0μM连续稀释液。
3.3如表1和2中所述，将L-乳酸盐标准品和含L-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微孔板中。
4.制备L-乳酸测定混合物：
4.1将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶探针（组分A）中。
4.2将50μLNAD储备溶液（100X，来自步骤1）加入到组分A的瓶子中（来自步骤4.1），并充分混合。
注意：这种L-乳酸盐测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的L-乳酸盐测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。
5.运行L-乳酸测定：
5.1将50μLL-乳酸盐测定混合物（来自步骤4.2）添加至L-乳酸盐标准品，空白对照和测试样品（参见步骤3.3）的每个孔中以使得总L-乳酸盐测定体积为100μL/孔。
注意：对于384孔板，在每个孔中加入25μL样品和25μLL-乳酸盐测定混合物。
5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时，避光。
5.3用A575nm / A605nm的吸光度读板仪检测吸光度比率的增加。
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文献和实验参考文献
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或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。 酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。 目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界
的单/ 低聚核小体片段的特别聚集值： 注： mU= 吸收值（ 10-3 ） = 双孔吸收值的平均 OD 值－底物 OD 值，若样品的吸 收值超过比色测定范围，应适当稀释后再检测。 细胞凋亡相关产品及资料 肿瘤抑制/细胞凋亡相关抗体 特异性siRNA库-细胞凋亡类 细胞凋亡检测试剂 细胞增殖检测试剂 流式细胞检测 荧光染料和淬灭剂
3.3 酶的底物 3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应，最具代表性的过氧化物为H2O2，其反应式如下： DH2+ H2O2 D+ H2O 上式中，DH2为供氧体，H2O2为受氢体。在ELISA中，DH2一般为无色化合物，经酶作用后成为有色的产物，以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二胺(O-phenylenediamine, OPD)、四甲基联苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, TMB)和ABTS[2,2'-azino
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