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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
三年
- 英文名:
Aliz-gal Agar
- 库存:
1
- 供应商:
广东环凯微生物科技有限公司
- 保存条件:
室温,阴凉干燥处保存
- 规格:
100g
022052 Aliz-gal琼脂
(Aliz-gal Agar)
用 途:
用于大肠菌群平板计数的快速检测 (GB/T4789.32-2002)。
原 理:
胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;大肠菌群可产生β-半乳糖苷酶,分解培养基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使茜素游离,并与培养基中的铝、钾、铁、铵离子结合形成紫色(或红色)的螯合物,使菌落呈现相应的颜色。
配方(每升):
胰蛋白胨20g
氯化钠5g
磷酸氢二钾2.75g
磷酸二氢钾2.75g
月桂基硫酸钠0.1g
Aliz-gal(纯度不低于97%)0.05g
异丙基硫代半乳糖苷0.03g
硫酸铝钾0.5g
柠檬酸铁铵0.5g
琼脂 15g
最终pH7.1±0.2
使用方法:
1、称取本品47.1g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,116℃高压灭菌10min,备用。
2、以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基。
3、37±1℃培养18—24h。
4、观察结果。
质量控制:
质控菌株接种后于37±1℃培养24h结果如下:
| 菌 名 | 菌 号 | 生长状况 | 培养特征 |
| 大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 良好 | 紫红色 |
| 产气肠杆菌 | CMCC(B)45103 | 良好 | 紫红色 |
| 鼠伤寒沙门氏菌 | CMCC(B)50115 | 良好 | 无色 |
| 金黄色葡萄球菌 | ATCC6538 | 受抑制 | ----- |
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
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文献和实验系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组 体。 二、使用方法 : 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg
,pUC系列载体 DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。 二、使用方法 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg
答案1: 说到底,X-gal只是半乳糖苷酶的作用底物,底物的量没有一个确定的值,只要底物的浓度足够显色就可以了,一般在培养基里,X-gal的终浓度是40ug/ml,IPTG的终浓度是24ug/ml,就可以显色,我们把这些直接涂在表面上,就更容易显色了,再多就有点浪费了 答案2:如果你的用量很多,很且急着用的话,做好直接加到培养基中。但若你只需一两个板的话,现用时再加,而且x-gal很贵,我一般是现涂的,每个板
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