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- 干扰载体构建
- 江苏南京
- 2026年03月08日
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- 服务名称：
干扰载体构建
- 提供商：
凯基生物
| 干扰载体构建 | |
| 实验目的：干扰载体构建，使目的基因特异性沉默 实验原理：利用双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)诱发的、同源mRNA特异性降解，从而抑制特异基因表达。 实验材料： 试剂：DNA 纯化试剂盒、DNA连接试剂盒、DNA聚合酶、DNA限制性内切酶、DNA连接酶等 仪器：SORVALL SHO3014、UV-visible Spectrophotometer、BIO-RAD Gel DocTM XR、Multitene TC9600-G-230V LabNet、ABI 3730 实验内容与方法： 1. 序列设计、合成 2. 连接转化 3. 菌检 4. 测序 5. 提交载体及质检报告 客户提供实验信息： 1、实验信息（客户提供）： 基因种属及名称 载体名称及相关信息 或其它信息。 2、实验材料提供 （1）样本材料； （2）试剂材料。 服务周期：4周至6周（视载体个数、难易程度而定） 结果提交：提交载体及质检报告（包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析）、原始数据、图片，文本或电子版。 实验范例： 1. Schematic overview of the mechanism of RNA silencing in the host cell |
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文献和实验的载体）或筛选稳定表达细胞（含有抗性的载体）。 7、检测目标基因蛋白或mRNA表达水平。 载体构建 对于实验中的很多步骤，您可以使用您实验室中常用的方法，或者您的实验经验证实有效的方法。对于酶切、DNA纯化以及转化等步骤，您可以参照《分子克隆实验指南》进行，也可以参照您购买的试剂盒中生产商提供的使用说明进行。 步骤1 ：退火寡核苷酸链 根据我们的经验，脱盐纯化的寡核苷酸足以满足连接和克隆需要。但是不同供应商提供的引物纯度差别很大，如果您连接
RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控，RNA干扰技术已已被广泛用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域，进行RNA干扰实验首先是构建RNA干扰载体，本文以pRI系列载体为例论述了干扰载体的构建的实验流程。 产品技术背景 pRI系列载体是基于III类rna聚合酶启动子：人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止
重组插入目的片段，启动子，终止子等是构建完整表达框时所需要的元件，标签序列等可以用于表达鉴定等实验。在质粒载体设计及构建工作中，根据实验的需求情况可以增减质粒载体上的具体元件，以及插入实验需要的相关基因。 2、质粒载体构建的常规流程 通常质粒载体构建的操作需要经过下图所示流程。其中目标序列确定需要根据实验需求以及查阅生物信息数据库的相关序列来确定。目标序列 PCR 扩增则根据实验需求以基因组 DNA 或者反转录得到的 cDNA 为模板，经过高保真 PCR 实验扩增得到相关目的片段。质粒载体确定由实验
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