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- EL1700
- 2026年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
1年
- 英文名：
Leishmania ELISA Kit
- 库存：
50000
- 供应商：
广州健仑生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
96T/盒
利什曼原虫ELISA 检测试剂盒说明书
自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的LSM-Ab标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的LSM-Ab含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-24IU/ml
4、敏感度： 0.1 IU/ml
注：该说明书由广州健仑生物科技有限公司技术人员编译，如有出入请以英文原版为准或与我们联系。
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文献和实验【求助】请教非单一且高度同源基因的RNAi问题，研究过小鼠骨钙素的请进
简繁 小鼠有三个串联的骨钙素（BGP，或OC）基因OG1、OG2、ORG，其中OG1和OG2在骨中表达，其基因序列高度同源但不完全一致，产物mRNA及蛋白亦稍有序列差别。 但是看文献中的骨钙素mRNA 的RT-PCR检测，均不提引物根据哪个基因设计；蛋白水平的检测亦不区分BGP1和BGP2，市面的小鼠骨钙素放免或酶免试剂盒亦笼统一用。 请教：我要做小鼠源成骨细胞的BGP RNAi，该以哪个基因为靶基因？随便选其中一个还是两个都照顾到？做RT
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就可以了。激活时需要输入邮箱名和密码第四步，点击“products”，选择你要的类别，比如选取肝炎系列。点击“View Instructions for Use” ，还会要求你输入一遍邮箱和密码。登陆好后选择试剂名称和所搭配的平台，比如我选的是酶免试剂平台axsym的肝炎系列第五步，输入后就会出来隐藏的部分了……所有的试剂名称和详细信息，点击最后那里就可以下载了。打开后是pdf格式的，可以保存到电脑上。大家试试，应该是可以成功的。不过我是电信网络，不知道教育网会不会有影响。
道。我认为其它在体内生长的寄生虫如弓浆虫或利什曼虫等，也可用这一技术来进行研究。我认为如果人们采用这种技术来研究其它的微生物感染，那么他们就能获得有关事件动态发展的很多深刻认识，不仅仅是感染的扩散，还有宿主的防御机制。” 阅读相关文章：Nature Methods 2, 489 (2005) | doi:10.1038/nmeth0705-489 Imaging and Visualization
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