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联硕生物
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联硕生物是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大客户的支持及公司全体员工不懈的努力下,公司的服务和业务网络已遍及全国,成为了国内生命科学领域产品的主要供应商之一。自成立以来,联硕生物一直秉承客户至上、服务至诚;诚信为本的理念,致力于做靠谱放心的专业服务商,助力您的科研成就!
主营品牌:Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主营产品:
试剂盒:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒
细胞培养:血清,专业培养基,常用传统培养基
耗材:进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
联硕生物(上海-浙江)
公司官网:www.biolianshuo.com
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文献和实验下降170℃以上,属于“骤冷”。这种极速降温会让细胞内水分来不及排出,快速凝结成大量细小冰晶,直接割裂细胞膜和细胞器,细胞几乎没有存活可能。 而-80℃冰箱的降温速度,恰好能实现“梯度降温”(通常为1-2℃/min)。把细胞放在-80℃,让细胞内的水分慢慢析出,形成的冰晶更大、数量更少,对细胞的机械损伤会大幅降低——就像冬天结冰,缓慢降温的水会形成完整的冰面,而骤冷的水会炸裂容器,道理是一样的。 二、让冻存液充分发挥作用 我们冻存细胞时,都会加入冻存液(常见的有DMSO、甘油等成分
):另取一离心管,加入基础培养基,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO),即制冻存 B 液,置于室温下待用,胎牛血清作为冻存 A 液,基础培养基:DMSO:胎牛血清 = 5:4:1。3. 细胞悬液和冻存液混匀:细胞离心毕弃去上清液。用血清重悬起细胞,缓慢加入冻存 B 液,轻轻吹打使细胞均匀。4. 分装:分装在 1 ml 冷冻管中,严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。5. 梯度降温冻存: 4 ℃,30 min → -20 ℃,10 min → -30 ℃,30 min→ -70 度冰箱过夜 → 置于液氮灌中
推荐使用程序降温盒,分装好的冻存管转入程序降温盒后直接放入-80℃冰箱过夜; 7、 如没有程序降温盒,则按下列顺序依次降温:室温→4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃过夜→液氮保存,注意转移过程中要保冷,避免产生温差或冻存管融化; 8、 从-80℃冰箱取出冻存管迅速转移到液氮长期保存。 注意事项: 1、 DMSO配制的时候会放热,一定要等冻存液冷却后使用,避免灼伤细胞; 2、 细胞离心后尽量吸干净上清液,减少培养基残留,避免稀释冻存液; 3、 不建议手动梯度降温,温度不稳定,容易
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