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联硕生物
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Corning® 15mL clear polypropylene (PP) centrifuge tubes come with the advanced polyethylene CentriStar™ caps and are bulk packed 50 per resealable zip lock bag. Foam racks can be purchased separately. The CentriStar™ Cap has a easy-on/easy-off flat top and offers advanced ergonomics with its wider knurls and roll-over edge design for easier gripping. This leak-proof design comes with a revolutionary plug feature that virtually eliminates all seepage when used under recommended conditions.
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文献和实验在0.1ml RNase-free水中,反复颠倒,使SA-PMPs散开,洗脱mRNA。 11.用磁性分离架捕获SA-PMPs,将洗脱的mRNA吸入另一个新的Eppendorf管中。 12.将SA-PMPs再悬浮于0.15ml RNase-free的水中,洗脱,与(11)步洗脱液合并。 13.将得到的mRNA溶液取几微升跑电泳,若mRNA浓度不足以进行下一步的反转录,则需将得到的mRNA溶液浓缩(浓缩步骤见14-18)。 14.加0.1体积的3mol/l NaAc和1.0体积
Buffer R-A,适当匀浆后收集合并到1.5ml 离心管。 (d)用带4~6 号针头的1ml 注射器反复吸注10次。 匀浆充分与否是决定RNA 和DNA 得率的关键。匀浆完全时,溶液不再粘稠,很容易从注射器针头上呈不连续滴状滴落,而非连续状。 2.吸取0.4ml 匀浆液转入另一1.5 ml 离心管中,若匀浆体积不足 0.4ml,加Buffer R-A 补充至0.4ml。 3.加0.15ml Buffer R-E,盖紧离心管,旋涡振荡混合均匀或或用步骤1 中使用的注射器反复吸注2~3次
d细胞达90%融合时传代。(4)传代培养:传代时先全部吸出培养液后,用无Ca2+ 、Mg2+PBS液洗涤二次,加入37℃预热的0.25%(2.5g/L,0.25%)胰蛋白酶(含1mmol/L EDTA,即用1mmol/L-EDTA-Na2配制)消化1~2分钟,吸去胰酶,以残留的胰酶继续消化,倒置显微镜下观察,细胞开始皱缩时(细胞开始变圆)加入完全培养液(3ml左右)终止胰酶作用。吸管反复吹打后将细胞收集于15ml离心管中,1500r/min 离心10分钟后弃上清,再用PBS液洗涤二次彻底洗去混
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