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100
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上海远慕生物
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无
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1mg/10mg
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文献和实验间接法免疫荧光组织化学染色步骤 1.检测抗原法以单层细胞培养标本为例介绍此法的染色步骤: (1)取出细胞贴附生长的小盖片,用预热的PBS冲洗2次; (2)4%多聚甲醛(或冷丙酮)固定5~10分钟,晾干; (3)0.01MPBS(pH 7.4)漂洗3次,每次5分钟。 (4)0.3%Triton X-100孵育,室温20分钟,PBS漂洗2次(细胞膜抗原可省略此步骤); (5)非免疫血清(或15%小牛血清)孵育,室温10分钟; (6)滴加特异性一抗(如小鼠抗大鼠
圆括号中所标的物种的 IgG 和 / 或血清蛋白的吸附处理的)。当其他物种免疫球蛋白的出现可能导致交叉反应时,推荐使用这类抗体。但是,当要选择经过针对相近物种吸附处理的抗体时,要特别注意,因为它们能识别的表位数量大大减小了,可能识别单抗的能力很弱。例如,在含有内源性免疫球蛋白的大鼠的组织样本中,只用经大鼠 IgG 吸附处理的抗鼠 IgG 检测大鼠组织中的鼠源一抗,或者在多标记实验中使用了大鼠的一抗。另个一个例子是抗大鼠 IgG(min X Mouse… Sr Prot) 和抗叙利亚仓鼠 IgG
8-AG的亚系210・RCr3.Agl(分泌k轻链),后者经两次克隆,选获Y3-Ag1.2.3。它经5个月连续培养后,与脾细胞的融合率可达到小鼠髓瘤细胞系的水平。在显微镜下,Y3-Ag1.2.3系及其杂交瘤细胞比小鼠P3-X63-Ag8骨髓瘤细胞要小的多。它在OMM培养液(含5%胎牛血清)生长良好,在软琼脂易产生克隆。Y3-Ag1.2.3及其杂交瘤所产生的克隆,细胞分布较分散,不象小鼠×小鼠杂交瘤的克隆细胞密集。用它与DA系大鼠脾细胞融合,获得抗小鼠IgG的大鼠McAb。其杂交瘤YAZ/4OH(LK
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