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上海远慕生物
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无
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1ml/10ml
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文献和实验,Protein A和Protein G的主要区别在于它们对不同的亚型的抗体表现出不同的亲和力,另外商品化的Protein G resin一般比Protein A的贵。 鉴于本页只介绍单抗的纯化,这里只列出二者对小鼠亚型的亲和特性: 从上面讲的,综合考虑经济因素以及纯化效率,可以知道除IgG1需要用Protein G外,其它亚型的抗体一般都选择Protein A亲和纯化,IgM的纯化方法比较需要运气,如果不可以用Protein A进行亲和纯化,只好看稍后介绍的方法了。 言规正传,这里简单介绍一下
。主要原因在于胶体金颗粒较小时有利于在标记溶液中的扩散运动;在胶体金直径一定时,蛋白分子量越小,金表面吸附的蛋白分子越多,活性位点也越密集,也容易于靶位点结合。 IgG 分子量为 150 kD 左右,由 4 个亚基组成,即两条重链( H )和两条轻链( L )。用水解酶(木瓜蛋白酶)水解后可得到两种片段,即 Fab 和 Fc 。其中 Fab 是具有抗原识别活性的部分,回收后制备探针。 Fc 能够与 Protein A 和 Protein G 特异性结合。但这种分离只能
值7.4巴比妥缓冲液应用液; 4) 每孔中再加入2MHD豚鼠补体(如1MHD=1∶80,2MHD=1∶40); 5) 在微量板上放一块玻璃板,周围用胶布密封,4℃放置16~18h; 6) 加入50μl致敏绵羊红细胞,再用胶布密封; 7) 37℃保温1h,每20min混匀一次; 8) 室温再放置2~5h或用MSE 6 L离心机2000 r/min离心5min; 9) 根据孔底沉降红细胞
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