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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
见产品外包装
- 英文名:
DIG Easy Hyb Granules
- 库存:
需确认
- 供应商:
嵘崴达
- CAS号:
见产品外包装
- 保存条件:
常温
- 规格:
6 X 100 ML
DIG Easy Hyb™杂交颗粒
powder, suitable for hybridization
别名:
DIG system
一般描述
DIG Easy Hyb是一种无毒、随时可用的杂交缓冲液。DIG Easy Hyb不含甲酰胺,但与含有50%甲酰胺的缓冲液相比,它可以降低杂交温度。
我们致力于为您提供更环保的替代产品,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该产品为一种安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明了DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交的DNA的唯一选择。
应用
DIG Easy Hyb杂交颗粒可用于所有的采用非放射性(例如,di高辛标记)核酸探针的膜杂交应用。它专为DIG试剂盒设计。
制备说明
无毒性颗粒,塑料瓶分装。复溶为100ml 1x溶液,即用型。
工作溶液:向塑料瓶中小心加入64ml灭菌双蒸水,在37℃下立即搅拌5分钟。提供的6 x 100 ml毫升规格让您可以根据需要轻松“配制”新鲜的DIG Easy Hyb——不需要长期储备溶液。
注:对于RNA印迹应用,DIG Easy Hyb颗粒必须在无RNase的条件下溶解。
| 11796895001 |
DIG Easy Hyb™杂交颗粒 |
6 X 100 ML |
| 11426338910 | Anti-fluorescein-ap Fab Fragme 抗荧光素ap抗体 | 150 U (200 µl) |
| 10904988001 | P1-5'-(7-Met)-G-P3-5'-GTPm7G(5 | 5 U (at 260 nm) |
| 11277081001 | Hexanucleotide Mix 六核苷酸组合 | 100 µl (50 reactions) |
| 11442074001 | BM Purple AP Substrate, precipBM紫色AP底物 | 100 ml |
| 11669940910 | DNA-Length-standard VII DIG | 5 µg (500 µl) |
| 10174645001 | Polynucleotide Kinase, 200 U多核苷酸激酶 | 200 U |
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文献和实验) and Whatman paper in the 20X SSC that remains. Set up transfer without a SSC resevoir, let stand overnight. Hybridization Prehyb: Incubate blot with 30mls of DIG Easy Hyb (Roche) for at least 1 hr at 42o C. Prehyb solution can be reused
[原理] DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物[抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶复合物(Dig)Ap]结合,接着在5-溴-4氯-3-吲哚磷酸盐(X-磷酸盐)和硝基四氮唑蓝(NBT)存在下,由酶催化反应,在杂交部位形成蓝紫色带或颗粒。 [操作] 1.转移 通过打点吸渍
下,将膜于2ml新鲜的colorsubstrate solution中显色(显色时不能摇动) 9、 待显色完全后TE-buffer或ddH2O中洗5min终止反应。 杂交: 1、 将适量体积(20ml/100cm2)的DIG Easy Hyb中预热到杂交温度,轻微摇动预杂交30min; 2、 DIG-labeled 探针(约25ng/ml)于沸水中煮5min变性,迅速冰浴; 3、 变性的DIG-labeled探针加入适量(3.5ml/100cm2)预热的DIG Easy Hyb中
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