SplintR DNA连接酶

特别提示：包括SplintR DNA连接酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：SplintR DNA连接酶
英文名称：SplintR DNA Ligase

产品货号：SplintR DNA连接酶
产品规格：1250U|5000U

SplintR DNA连接酶能够高效催化相邻的DNA核苷酸的连接，这个连接过程需要一条互补的RNA在两条DNA单链间起“夹板”或“桥梁”的固定作用。PBCV DNA连接酶的这种活性远远优于传统的T4 DNA连接酶，有助于miRNAs和mRNAs，包括SNPs在内的研究方法的创新。另外，在二代测序和分子诊断等众多领域中，PBCV DNA连接酶是富集目的基因的理想选择。它具有稳定的生物活性，对 RNA 介导固定的DNA 底物亲和性强（米氏常数Km = 1nM），能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特定RNA。因此，在RNA检测技术中，PBCV DNA连接酶不失为最佳选择用酶。

产品组成：

组分	1250U	5000U
SplintR DNA Ligase(25 U/μl)	50μl	200μl
10×SplintR Ligation Buffer	250μl	1ml

储存条件：-20℃可保存3年。

产品应用：
· 单链DNA的连接
· 基于探针法的miRNA的检测
· SNP或剪接体的检测
· RASL分析

活性定义：1单位指20μl反应体系中，1×SplintR连接酶反应缓冲液，16℃ 条件下，15 分钟内能使 2 pmol的DNA:RNA 杂交底物连接反应完成50%所需的酶量。

反应温度及失活：该酶的最佳反应温度为25度，可在16-37度之间优化，37度可明显提高反应的特异性；该酶在65℃ 加热20分钟即可失活。

使用注意事项：
1．1×SplintR Ligation Buffer：50mM Tris-HCl pH 7.5，5mM MgCl2，10mM DTT。
2．该酶对ATP的要求比较宽泛，10-100uM ATP范围内都可发挥活性，5mM Mg2+可显著增加连接产物的量，最佳ph为7.5～8.0。
3．该酶对一价阳离子非常敏感，如Nacl或KCl的浓度应低于50mM，100mM的Nacl会完全抑制连接反应。
4．该酶的反应温度为16～37℃，随着温度的上升酶活性会提高，但此时腺苷化产物也随之增加，最佳温度为25 ℃。
5．连接效率随着夹板RNA长度的减少而降低，当长度小于等于10nt时，连接效率为零。
6．供体的5’端第一个碱基为“A/T”时连接效率最高。
7．受体的3’端第一个碱基为“T”时连接效率最高，3’端第一个碱基为“G”时连接效率最差。

使用方法：
1．底物和夹板退火
建议反应体系中底物浓度在50 nM～2μM 之间，体系中酶的浓度低于1μM（该SplintR酶为 10μM）。在连接反应中，酶的浓度可设为底物浓度的2～3 倍。将等摩尔浓度的底物混合均匀，75℃ 2分钟后缓慢降温至室温。
2．连接反应
  退火后产物（1μM）————————————2μl
  10× SplintR Ligation Buffer 2——————2μl
  SplintR DNA Ligase————————————1μl
  灭菌水——————————————————up to 20μl
  25℃反应15～60分钟。
3．65℃加热20分钟，使酶失活。

别名：PBCV DNA连接酶；Chorella病毒DNA连接酶

除了SplintR DNA连接酶,PBCV DNA连接酶,Chorella病毒DNA连接酶，我公司还供应以下相关产品：



名称：β-琼脂糖酶Ⅰ
货号：BTN120623
规格：100U
 β-琼脂糖酶切割琼脂糖亚单位或未置换的新琼脂乙糖(3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖)生成新琼脂-寡糖(1)。β-琼脂糖酶 I 消化琼脂糖，形成不能再成胶的碳水化合物分子，同时释放所俘获的DNA。通常残留的碳水化合物分子或β-琼脂糖酶 I 不会影响随后的限制性内切酶消化、连接反应及转化反应等 DNA操作。反应原理如下：

 本产品来源重组E.coli菌株，此菌株的质粒上携带有β-琼脂糖酶I的基因编码。
 本产品无核酸内、外切酶或核酸酶污染，可用于从琼脂糖凝胶中提取DNA。

活性单位定义：1单位指42℃、1小时条件下，消化200μl低熔点琼脂糖或NuSieve琼脂糖生成可溶性新琼脂-寡糖所需的酶量。

热失活：95℃,2分钟或65℃,15分钟温育可使50单位的β-琼脂糖酶I失活。β-琼脂糖酶I可以在45-50℃保持几个小时的活性。反应体系中存在琼脂糖可以稳定β-琼
脂糖酶I。

储存条件：低温运输，-20℃ 保存，有效期一年。

备注：
➤ 琼脂糖：由于在反应温度42℃条件下，溶液必需要呈液态，所以仅低熔点琼脂糖适合于用β-琼脂糖酶I消化。
➤ pH值的敏感性：β-琼脂糖酶I在pH6.5时有最适酶活力，在pH5.0-8.5范围内可以保持>75%的酶活力。
➤ 对盐的敏感性：NaCl或Na2 EDTA浓度在50到500mM之间不影响β-琼脂糖酶I活性。

名称：BstUI限制性内切酶
货号：SV0263
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液，60℃。
浓度
10,000units/ml。
37℃ 时活性
20%。
甲基化敏感性
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项
BstUl是FnuDll的完全同裂酶。

名称：ScaI-HF限制性内切酶
货号：SV0679
规格：5KU|5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：α1-6 甘露糖苷酶
货号：SV1515
规格：4KU|800U
概述:
α1-6 甘露糖苷酶是一种高特异性的糖苷外切酶，催化寡糖未分支的 α1-6 糖苷键连接的 D-吡喃甘露糖残基酶解。当与 α1-2,3 甘露糖苷酶共同作用时，该酶将从分支的碳水化合物底物中切除α1-6 甘露糖残基。
来源:
基因克隆自木薯细菌性枯萎病菌（Xanthomonas manihotis），在 E. coli 中表达。
反应条件:
1X GlycoBuffer 1 反应缓冲液。添加 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。热失活:65℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂:
10X GlycoBuffer 1 反应缓冲液，100X BSA。
比活力:
~137,000 units/mg。
分子量:
58,000 daltons。
质量保证:
无糖苷外切酶污染，无蛋白水解活性。
单位定义:
1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol Manα1-6Manα1-6Man-AMC 中超过 95% 的末端 α-D-甘露糖水解所需要的酶量。
浓度:
40,000 units/ml。
注意事项:
对硝基*(代"苯")-α-D-吡喃甘露糖不是本酶底物。