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- 英文名:
Transcriptor Reverse Transcriptase
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嵘崴达
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−20°C
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50 REACTIONS
转录酶
别名:
reverse transcriptase, RT-PCR
一般描述
一种重组逆转录酶,用于在热循环仪和实时PCR仪器上进行两步RT-PCR,以稳定转录最高达14 kb的RNA片段。
在逆转录病毒中,如人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1),逆转录酶是核心酶。HIV-1 RT由两个亚单位66 kDa和51 kDa(p66和p5l组成)。一种HERV-K家族的人类内源性逆转录病毒,可编码逆转录(RT)酶。
应用
Transcriptor逆转录酶设计用于使用传统热循环仪和实时PCR仪器(例如LightCycler®仪器)转录各种来源的RNA(mRNA、总RNA、病毒RNA,以及体外-转录RNA),用于以下应用:
- 合成第一链cDNA用于后续扩增反应
- 富含GC的RNA模板的RT-PCR
- cDNA合成期间Cy3、Cy5、DIG、生物素和氨基烯丙基标记
- 根据RACE检索和克隆mRNA的第5′端和第3′端
- 带大量嵌入物的cDNA文库的生成
- DNA双脱氧测序
- RNA测序
- DNA片断3′端标记
- 用于基因组足迹的单链探针的生成
- 人类乳突病毒E6的RNA、皮层和纹状组织、贝克肌营养不良样本的肌肉活检以及卵母细胞和人类大脑微血管内皮细胞(hCMVEC)的miRNA的逆转录。
生化/生理作用
人类免疫缺陷病毒1型逆转录酶(HIV-1 RT)对于将单链病毒RNA催化转化为整合到宿主细胞染色体中的双链线性DNA至关重要。
| 3531295001 | Transcriptor Reverse Transcriptase,转录酶 | 500 U (50 reactions) |
| 10567647001 | Restr.-Endonucl. Hpa I, 500 u | 500 U (3 - 10 U/µl) |
| 10606120001 | Restr.-Endonucl. Sph I, 500 U | 500 U (10 U/µl) |
| 10642690001 | Restr.-Endonucl. Pvu II, 1000 | 1,000 U (10 U/µl) |
| 10656313001 | Restr.-Endonucl. Hind III, 500 | 5,000 U (10 U/µl) |
| 10814270001 | Primer,for cDNA Synthesis, p(d | 40 µg (1 A260 unit, 8 nmol) |
| 10827754001 | Restr.-Endonucl. Dra I, 5000u | 5,000 U (10 U/µl) |
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文献和实验逆转录反应,作为分子生物学研究的基本技术之一,已经广泛应用到多个研究领域,可以说是科研人员进行 RNA 功能研究的看家本事。 众所周知,逆转录的应用领域有以下 6 种: 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 定量RT-PCR(RT-qPCR) cDNA 克隆和文库构建 cDNA 末端快速扩增(RACE) 基因表达芯片 RNA 测序(RNA-Seq) 今天,小编就整理了一些贴士,帮助大家在面对 6 种不同的应用时,如何正确选择逆转录酶。 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 在 RT
基因转录是以 DNA 为模板,在依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶的催化作用下,将 4 种核苷酸合成 RNA 。 原核生物的 RNA 聚合酶的结构很相似。在真杆菌中只有一种,负责 mRNA 、 tRNA 和 rRNA 的合成。大肠杆菌 RNA 聚合酶由多个亚基组成,全酶 (holoenzyme) 是α 2 β ' βσ,相对分子质量约 480 000 。口亚基同全酶的结合不紧密,很容易解离下来。除去σ因子后剩下的部分称为核心酶 ( α 2 ββ ') 。 利福霉素类药
反转录酶(Reverse transcripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。这种酶需要镁离子或锰离子作为辅助因子,当以mRNA为模板时,先合成单链DNA(ssDNA),再在反转录酶和DNA聚合酶Ⅰ作用下,以单链DNA为模板合成“发夹”型的双链DNA(dsDNA),再由核酸酶S1切成
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