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杂交瘤细胞单克隆抗体测序

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  • 2025年09月17日
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      杂交瘤细胞单克隆抗体测序

    杂交瘤抗体基因测序服务

    杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特点,又融合了淋巴细胞可以分泌特异性抗体的能力,形成了其独特的优势。多年来,杂交瘤技术依旧是单克隆抗体制备最为重要的技术之一。但是杂交瘤细胞在保存过程中存在抗体基因丢失、细胞状态不好影响抗体产生,甚至细胞死亡的情况,为将优秀抗体长期保存、稳定生产,可将杂交瘤细胞中的抗体基因提取并测序,最终拿到核苷酸序列,并以 DNA 形式保存,用于后期外源表达及生产。

     

    服务特色

    • 快至5日交付
    • 1株起做V区测序
    • 100%准确

     

    服务详情

    近岸蛋白提供杂交瘤细胞抗体基因提取服务,包含多个种属测序(小鼠、大鼠等物种)、多亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgM等)。不仅可以快速获得单抗的基因,并且可以提供抗体表达服务、抗原抗体亲和力检测服务和抗体工程化改造服务

     

    实验流程

    产品细节图片1

    服务流程

    提供检测样品要求

    细胞数≥1*106或Trizol细胞裂解液(提供抗体细胞种属&亚型)

     

    一站式服务(可选)

    • 载体构建

    • 重组抗体生产

    • 活性检测(BLI、SPR)

    • 抗体人源化

    • 抗体亲和力成熟

    • 细胞株构建(检测/生产)

    服务项目

    服务内容

    服务周期

    交付内容

    杂交瘤细胞测序

    • 总RNA提取
    • RT-PCR获得cDNA
    • 抗体可变区扩增
    • PCR测序
    • 结果分析

    快至5日

    测序报告

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    • 单克隆抗体技术:杂交瘤细胞的选择

      经 HAT 选择培养基培养 10 ~ 14 天,未经融合的骨髓瘤细胞相继死去,而杂交瘤细胞即可逐渐长成细胞集落。停用 HAT 液后,改用 HT 培养基。当细胞集落面积超过培养孔的 1 / 10 以上时,即可用敏感的免疫学方法检测出阳性孔。连续三次检测逐渐升高或维持在同一水平者,则可以做克隆化,一部分则冷藏起来做长期保种用。  

    • 单克隆抗体技术:杂交瘤细胞的保存

      保存   当获得产生所需的单克隆抗体杂交瘤细胞后,必须将一部分杂交瘤细胞保存,否则在连续传代的过程中,可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗体的特性。另外在长期的培养过程中,难免不发生污染以至于毁灭。所以必须冷藏保存一部分。保存方法如下: 1 .材料 (1) 细胞:取对数生长期的细胞。 (2) 10 %二甲基亚砜保护液(二甲基亚砜能损坏滤器,而又被高压所破坏,所以不能过滤或高压

    • 技术分享 | 终于有人把主流的单抗开发平台总结清楚了

      B细胞抗体开发技术做进一步总结。 抗体发现与筛选—杂交瘤技术平台 杂交瘤技术又称为单克隆抗体技术,是在体细胞融合的技术基础上发展而来的。这项技术将免疫动物的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,即可形成在体外长期存活并分泌免疫蛋白的杂交瘤细胞,通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系,即杂交瘤细胞系,利用杂交瘤细胞大批量地生产单克隆抗体。 杂交瘤技术优势和应用 杂交瘤抗体技术起源于上世纪80年代,技术成熟,广泛应用于单克隆抗体

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