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- solarbio
- 北京
- B8030.
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
3年
- 英文名：
Bis Benzimide Hoechst NO33258
- 库存：
大量
- 供应商：
Solarbio
- CAS号：
23491-45-4
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
25mg
| 有效期 | 3年 |
|---|---|
| 英文名称 | Hoechst 33258 |
| CAS | 23491-45-4 |
| 分子式 | C25H24N6O·3HCl |
| 分子量 | 533.88 |
| 储存条件 | −20℃ |
| 纯度 | Purity≥98%(TLC) |
| 外观（性状） | 黄色或绿色粉末 |
| 单位 | 支 |
别名：2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2- (4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258； Hoechst 33258
说明：荧光色素；用于DNA、染色体和核酸的染色；荧光染色法和免疫荧光技术。Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
物理性状：黄色至深黄色粉末；溶于水，黄或棕色溶液，参考浓度为9.80 - 10.20 mg/ml；熔点＞300℃。
用途：细胞遗传学研究的常用试剂，荧光染色细胞的DNA ，插入DNA的A-T区，具有低的细胞毒性，形成膜渗透性荧光DNA链。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
配制母液
Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备10～50µM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的细胞或组织染色：
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
a) 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
b) 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
c) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
3. 活细胞或组织染色：
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。
c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
说明：荧光色素；用于DNA、染色体和核酸的染色；荧光染色
法和免疫荧光技术。
别名：2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-
2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2-
(4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4-
piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258；
Hoechst 33258
分子式：C25H24N6O · 3HCl 分子量：533.88
CAS＃：23491-45-4
外观：黄色或绿色粉末
特性：纯度：≥98% (TLC和HPLC)
溶解性：溶于水，参考浓度10 mg/ml。
R：22-36/38 S：26-36
储存条件：−20℃
相关文献：
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文献和实验性会受到很高的背景干扰。Hoechst 33258，一种二苯甲亚胺DNA结合物，在检测时会有比紫外激发更强的荧光产生，检测更灵敏。它在紫外区(350nm)附近被激发，发射波在蓝光区(450nm)，检测dsDNA的灵敏度是10ng/ml（见图 1）。 图 1 用Hoechst染料和紫外激发光对dsDNA定量分析，加2倍Hoechst染料工作液之前，用1倍的TNE对1 μg/ml的DNA做倍比
颗粒位于细胞表面和细胞之间。 ②荧光染色法：荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258，可使支原体内含有的DNA着色，染色后用荧光显微镜观察。具体方法如下：首先将细胞接种盖玻片上，在细胞未长满前取出玻片，用不合酚红的Hanks液漂洗一下，用l： 3醋酸甲酵固定10Min，然后用生理盐水漂洗。置于用生理盐水配浓度为50pg／ml的Hoechst 33258中染色10min。染色后用蒸溜水洗1—2min。向细胞面滴加pH5.5磷酸缓冲液数滴，然后置荧光显微镜下观察。镜下支原
Hoechst 33258染色1．原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮
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