- ￥1250
- Fermentas
- 美国
- K1622
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 英文名：
RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit
- 库存：
30
- 供应商：
Fermentas
- 保存条件：
-20°C
- 规格：
100 react
特点
应用
- 全长的第一链cDNA产量高，最长可合成13 kb的cDNA。
- 增加的反应温度范围：42-50°C。
- 配套提供RiboLock™ RNase Inhibitor。
- 完全 一 试剂盒提供oligo(dT)18和随机六聚体引物。
应用
- 第一链cDNA合成，作为RT-PCR和实时RT-PCR模板(1, 2)。
- 构建全长cDNA文库。
- 制备杂交用探针。
- aRNA合成。
说明
RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit是一个完整的以RNA为模板高效合成第一链cDNA的反应体系。该试剂盒可合成长达13 kb的cDNA。
该试剂盒使用的RevertAidReverse Transcriptase具有的RNase H 活性比AMV reverse transcriptase低。
试剂盒配套提供的重组RiboLock™ RNase Inhibitor有效保护RNA模板免于降解。该产品与逆转录反应完全兼容，因为其在50°C时仍然保持活性。
试剂盒配套提供oligo(dT)18和随机六聚体引物。oligo(dT)18与mRNA 的poly(A)尾选择性结合。随机六聚体引物转录无需poly(A) 尾，因此可转录mRNA的5’-端区域，也可以无poly(A) 尾的RNA (micro RNAs)为模板合成cDNA。试剂盒也可使用基因特异性引物。
第一链cDNA可直接作为PCR (见RT-PCR操作说明书)、实时PCR或第二链cDNA 合成(见操作说明书)的模板。
质量控制
功能测试：以多聚腺苷酸RNA转录子为模板合成第一链cDNA(分别测试特异性引物、oligo(dT)18和随机六聚体引物)。合成的cDNA作为后续PCR的模板。
组分
- RevertAid™ Reverse Transcriptase
- RiboLock™ RNase Inhibitor
- 5X Reaction Buffer
- dNTP Mix,10 mM each
- Oligo(dT)18 Primer
- Random Hexamer Primer
- Forward GAPDH Primer, 10 µM (5'-CAAGGTCATCCATGACAACTTTG-3')
- Reverse GAPDH Primer, 10 µM (5'-GTCCACCACCCTGTTGCTGTAG-3')
- Water, nuclease free
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文献和实验相关实验
性扩增，可以通过调整引物的量、模板的量、镁离子来解决。若没有目的条带，调整引物的量、模板的量、镁离子纯属瞎闹。 (3)模板 提取总RNA和逆转录时大家只要严格按照试剂盒的说明书操作就行了，没什么技巧。 提取总RNA我用英俊( invitrogen )的 Trizol，量一定要够。逆转录我用 fermentas(MBI) 的逆转录试剂盒 (RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit,http://www.fermentas.com
二聚体，非特异性扩增，可以通过调整引物的量、模板的量、镁离子来解决。若没有目的条带，调整引物的量、模板的量、镁离子纯属瞎闹。 3. 模板 提取总RNA和逆转录时大家只要严格按照试剂盒的说明书操作就行了，没什么技巧。提取总RNA我用英俊（invitrogen）的Trizol，量一定要够。逆转录我用fermentas（MBI）的逆转录试剂盒（RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit），货号K1622，很好用，加好样后，按42度60分钟、70度
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Thermo fisher MBI，Fermentas k1622逆转录试剂盒 RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit
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