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- invitrogen
- 美国
- AM2071
- 2025年07月15日
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- 英文名：
Ambion™ SP6 RNA 聚合酶，克隆型，20 U/μL
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嵘崴达
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1,000 units
Ambion™ SP6 RNA 聚合酶，克隆型，20 U/µL
货号: AM2071
产品描述
这种克隆的高纯度 Ambion™ SP6 RNA 聚合酶对其启动子具有高度特异性。该酶可以将启动子下游的 DNA 序列转录成 RNA，且启动子之间不会发生交叉干扰。以每管含浓度为 20 U/µL 的 1,000 U 聚合酶的单管形式提供。该酶较高的纯度使其成为合成高比活性 RNA 杂交探针、生物学活性 mRNA 和反义 RNA 的理想选择。关于是否污染非特异性核酸内切酶、核酸外切酶、蛋白酶和 Rnase 活性，RNA 聚合酶已经过严格检测。该酶的功能分别在ji佳 UTP 浓度和限制 UTP 浓度条件下通过体外转录反应进行了测试。
单位定义：
一单位指在 37°C条件下在60分钟内催化掺入 1 nmol 核苷三磷所需的 SP6 RNA 聚合酶量。
上海嵘崴达实业有限公司，专业经营生命科学领域的科研试剂、仪器和实验室消耗品，
致力于向国内生命科学研究人员提供合格产品和完善服务。
主要经营的试剂品牌：
Roche试剂，部分常用现货，周三定货，2-3周到货。
GE试剂，耗材，部分常用现货，周二，周五定货，3周左右。
SIGMA试剂，周一，五定货，3周左右到货。
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ABCAM试剂，国内现货三天左右，期货四周左右。
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罗氏原料，请来电来邮咨询。
OXOID，BD培养基础货期八周左右，部分现货。
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文献和实验的 ULTRAhyb-Oligo 缓冲液（17x 缓冲液）。使用前需在 68℃ 环境中进行溶解。 ( 7 ) 用 0.5 U T4 多核苷酸激酶（PNK，Roche) 和 6 μl [γ-32P ] ATP ( 5000 Ci/mmol ) 标记 1 μmol/L DNA 寡核苷酸（约含有 10 个与目的基因互补的 DNA 寡核苷酸）。 ( 8 ) 参照 Hamilton 和 Baulcombe 的方法，在 35°C 条件下进行 RNA 印迹杂交[14]。 3. 注释 注
来源的模板DNA 。 二、设备：移液器及吸头，硅烷化的PCR 小管，DNA 扩增仪(PE公司)，琼脂糖凝胶电泳所需设备(电泳槽及电泳仪)，台式高速离心机。 三、试剂： 1、10×PCR 反应缓冲液：500mmol/L KCl, 100mmol/L Tris·Cl, 在25℃下, pH9.0, 1.0％ Triton X-100。 2、MgCl2 ：25mmol/L。 3、4种dNTP混合物:每种2.5mmol/L。 4、Taq DNA 聚合酶5U/μl。 5、T4 DNA 连接
于4℃或-20℃。 [注意] 1、纯化树脂在使用前必须充分混匀。 2、PCR 产物中矿物油应尽量吸去，否则会影响提取DNA 的 产量。 四、载体加dT尾 1.将1μg pUC19用SmaⅠ全酶切。 2.在小管中按上述PCR 反应,加入各种混合物,除将4μl 4种dNTP改为4μl 25mM dTTP。 3.加入1μl(5U)的Taq DNA 聚合酶在72℃下加热2h。 4.按前面三中所述,用酚:氯仿:异戊醇抽提二次。 5.加入2倍体积 95％乙醇,在-20℃下沉
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