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-20度
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现询客服
- 英文名:
SABC(Rabbit IgG)-AP Kit
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预定
- 供应商:
Solarbio
- 规格:
100-200T
SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。在实际实验过程中,其比直接酶标二抗敏感5-10倍,是免疫组化的理想方法。 基本原理 SABC是链霉亲和素-生物素-酶(或者FITC)复合物。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中,分子量67000,是一种碱性蛋白。对生物素有很强的结合力。链霉亲和素是从链霉菌中提取的一种蛋白质,分子量47000,等电点为6.0-6.5,也对生物素有很强的结合力,但其等电点接近中性,明显消除了原碱性蛋白所引起的非特异性吸附。 生物素活化后,可以标记抗体和酶而不影响其活性。再经SABC放大,一分子的抗体可以结合几十分子的酶或者荧光素,从而有很强的放大作用。 为了与一抗更好的配合,为了大家实验的方便,索莱宝公司特进口分装国外优质的SABC试剂盒,其包括过氧化物酶,碱性磷酸酶和FITC三大系列,配以其他相关试剂,可以满足大部分免疫组化的工作需要。SABC试剂盒可按一抗种属来源(小鼠、兔、山羊)和显色方法(DAB、BCIP/NBT、FITC)来分。 如果一抗种属来源和显色方法为其他,请预订。
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文献和实验两者所用的显色系统也不同。SP法与SAP法的其他染色步骤同SABC法。 Envision TM SVStemS 该法是近几年在国内推广使用的一种方法,它的原理是将多个抗鼠和抗兔IgG分子与辣根过氧化物酶结合形成聚合物。以代替传统方法的二抗和三抗,直接与特异性第一抗体结合,从而放大了抗原抗体结合的信号,使检测变得简单而且敏感性增加。经DAB显色即可完成染色,其他染色步骤与SABC法相同。 Envision TM SVStemS原理示意图
说明:这是我今年做免疫组化的一点体会,奉献给大家。如有不正确的地方,敬请指教。同时,这也是我应付《免疫组化》的一份作业,老师给了我85分。斑竹呀,如果觉得有点用,就请鼓励一下,加点分吧!:D:D:D应用SABC法进行免疫组化染色的体会SABC(Strept Actividin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。由于该方法中的链霉亲和素的等电点接近中性(pH=6.0-6.5),对组织和细胞的吸附性特别低,因而具有较低的背景。它的步骤
FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如,在实验设计时,选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗,相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时,由于两种一抗种属来源不同,可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗,滴加二抗时,先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育,洗涤后,滴加SABC-Cy










