- ￥3488
- QIAGEN
- 德国
- 74104
- 2025年12月23日
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见包装
- 英文名：
RNeasy Mini Kit (50)
- 库存：
999
- 供应商：
武汉科昊佳生物科技有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
50次/盒
Qiagen RNA小量提取试剂盒 74104（50）
| 名称 | 品牌 | 货号 | 规格 | 保存 |
| RNA小量提取试剂盒 (50) RNeasy Mini Kit (50) |
Qiagen | 74104 | 50次 | RT |
一、产品详情RNeasy试剂盒是总RNA分离的金标准。它们使用硅膜RNeasy旋转柱或96孔板，可以从小到大数量的细胞、组织和酵母中快速纯化高质量的RNA。组织样本可以方便地使用RNA保护组织试剂或所有保护组织试剂来稳定，并使用组织分子ll或组织分子ll或LT系统来有效地破坏。RNeasy 96 Kit可以使用二氧化硅膜RNeasy 96板从多达96个培养的细胞样本中高通量纯化总RINA。一个专用的RNeasyQIAcube工具包可以在QlAcube连接上自动纯化1-12个样品。
二、产品特点
●快速程序，在几分钟内提供高质量的总RNA
●现成RNA在任何下游应用中高性能
●一致RNA产量从小到大量的起始材料
●无苯酚/氯仿萃取，无氯化铯梯度，无氯化锂或乙醇沉淀
●高通量96孔格式处理和自动化协议
三、产品性能展示
RNeasy试剂盒和QIAwave RNA试剂盒可从小到大的样本中提供高度可重复的总RNA产量。总RNA可以从少量细胞（包括单个细胞）以及少量标准组织中可靠地纯化（见图"从单个细胞中可靠地分离RNA"，"高度可重复的敏感应用产量"和"来自细针抽吸的高质量总RNA"）使用RNeasy微试剂盒。使用RNeasy Micro Kit提纯的RNA在定量基因表达分析（如实时RT-PCR）中提供了最大灵敏度，通过高效地柱上消化基因组DNA（见图"高效柱上去除基因组DNA"）。
总RNA易于从动物或人类细胞、动物或人类组织以及酵母中纯化（见表"使用RNeasy试剂盒获得的总RNA产量"和图"最多从100个细胞中提取的RNA的RT-PCR"）。
QIAwave RNA Mini Kit让您从动物或人类细胞、动物或人类组织以及酵母中获得高度可重复的RNA产量（见表“使用RNeasy和QIAwave RNA试剂盒获得的总RNA产量"）。我们的QIAwave RNA迷你试剂盒和RNeasy迷你试用品之间的性能是相同的，因为化学成分相同。我们还展示了两个试剂盒的性能都优于竞争对手的试剂盒（见图"QIAwave RNA迷你试剂盒性能"）。
专用的RNeasy Mini QIAcube试剂盒，包括预装RNeasy旋转柱和洗脱管的转子适配器，提供了更大的便利和节省时间（见图"使用专用QIAcube试剂盒节省大量时间"）。
使用RNeasy Maxi试剂盒纯化的总RNA质量高，适用于许多下游应用（见图"来自多种样品的优质 RNA"）。总RNA很容易用RNeasy Maxi Kit从大量的起始材料中纯化，包括动物或人细胞、动物或人组织以及酵母细胞（见表"使用RNeasy Kit获得的总RNA产量"）。
RNeasy96系统为高通量基因表达谱分析提供快速可重复的总RNA纯化。RNA适用于敏感的应用，如定量、实时RT-PCR和微阵列分析（见图"用于低拷贝转录本敏感分析的优质RNA"）。样本量从10到5x105个细胞（见图"从100个细胞中提取RNA的RT-PCR"），并且可以从大量样品中纯化高质量的RNA（见图"可重复的高质量RNA产量"）。在整个纯化过程中，个体差异很低；TaqMan®阈值循环值在过程结束时很容易实现，变异系数（CV）小于3%，使用QuantiTect Probe RT-PCR试剂盒（见图"全自动RNA纯化的可重复性")。
从单个细胞中出可靠的分离RNA。
使用RNeasy微试剂盒从指定数量的Hela细胞中分离总RNA。[A]放大图。[B]交叉点（Cp）值与细胞数的相关性。使用实时荧光定量探针RT-PCR试剂盒在光循环系统上进行实时RT-PCR检测，并使用针对β-actin的引物和探针。
高度可重复的敏感应用产量。
使用RNeasy Micro Kit，由5个不同的使用者从2mg的大鼠组织中分离总RNA。采用定量探针RT-PCR试剂盒在ABI序列检测系统上进行定量、实时RT-PCR，采用针对c-jun的引物和探针。
来自细针抽吸的高质量总RNA。
使用19.5-qauge活检针从兔肝中获得细针吸出物，样本立即稳定在RNA保护组织管中。总RNA使用RNeasy Micro Kit进行分离。用安捷伦2100生物分析仪扫描显示了高质量的RNAis。
高效柱上去除基因组DNA。
使用RNeasy微试剂盒从指定数量的Hela细胞中分离总RNA。采用QuantiTect探针PCR试剂盒，采用针对c-jun的引物和探针。为了评价柱上DNase酶切的效率，每个样品在逆转录+RT后进行直接扩增，不需要逆转录步骤（-RT）。在“-RT”样本中缺乏信号表明没有检测到DNA。在“-RT”结果中，只有50.000个单元格数据点是可见的。
仅从100个细胞中提取RNA的RT-PCR。
用RNeasy Mini Kit从指定数量的Hela细胞中分离的总RNA进行RT-PCR检测。10ul（1/5）洗脱液用无rnose的DNase酶切，用cDNA混合物的oligo-dT primer.2.5μl（1/20）逆转录，进行50μl PCR。扩增了一个452bp的GAPDHs片段。C-:阴性载体|C+：阳性对照；M：100bp阶梯。
使用RNeasy和QIAwave RNA试剂盒获得的总RNA产量
| Source | Starting material | Average yield | ||||||||
| Animal cells | Micro | Mini/ QIAwave Mini |
Midi | Maxi | 96-well | Micro | Mini/ QIAwave Mini |
Midi | Maxi | 96-well |
| LMH | 5x105 | 1x106 | 7x107 | 5x108 | 1x105 | 6µg | 12µg | 850µg | 5.7mg | 1.3µg* |
| HeLa | 5x105 | 1x106 | 7x107 | 4x108 | 1x105 | 5µg | 15µg | 1000µg | 6.0mg | 1.6µg* |
| COS-7 | 5x105 | 1x106 | 3x107 | 1.8x108 | 1x105 | 17.5µg | 35µg | 950µg | 5.8mg | 3.1µg* |
| Lymphocytes (unstimulated) |
5x105 | 1x106 | 1x108 | 5x108 | – | – | 0.5µg | 50µg | 0.3mg | – |
| Huh7 | 5x105 | – | – | – | 1x105 | 7.5µg | – | – | – | 2.0µg* |
| Jurkat | 5x105 | – | – | – | 1x105 | – | – | – | – | 1.4µg* |
| Mouse tissue | ||||||||||
| Liver | 5mg | 10mg | 200mg | 1g | – | 15µg | 40µg | 700µg | 3.6mg | – |
| Lung | 5mg | 10mg | 100mg | 0.5g | – | 5µg | 10µg | 130µg | 0.6mg | – |
| Spleen | 5mg | 10mg | 200mg | 1g | – | 15µg | 35µg | 600µg | 3.2mg | – |
| Yeast cells | ||||||||||
| S. cerevisiae | – | 1 x 107 | 2x108 | 1x109 | – | – | 25µg | 450µg | 2.4mg | – |
*数量可能因发育阶段、所用的生长条件等而有所不同。
QIAwave RNA迷你试剂盒性能。
使用QIAwave RNA迷你试剂盒、RNeasy迷你试剂盒或供应商n的试剂盒从1x106 Jurkat细胞中纯化RNA。在纯化过程中，通过DNase I消化去除gDNA污染，纯RNA在无RNase的水中洗脱。用荧光计测定总RNA产量。
使用专用 QIAcube 试剂盒可节省大量时间。
使用手工处理、使用QIAcube和使用QIAcube与专用套件进行样本准备所需的实际操作时间的平均百分比。值可能略有不同，取决于QIAcube应用程序和所使用的套件。
来自多种样品的优质RNA。
用RNeasy Maxi试剂盒纯化的甲醛琼脂糖凝胶和总RNA的北玻片。从每个来源分离出的总RNA（10μg）被装载在每车道上。所有组织均来自小鼠。酵母：酿酒酵母；大肠杆菌菌株：HB101。32 P-标记的探针识别（G）GAPDH；（E）翻译延伸因子EF-1α；和（O）外膜蛋白A序列。（E和O分别由P. Philippsen，瑞士巴塞尔大学和U. Henning，德国蒂宾根马克斯·普朗克生物研究所提供。）枯草芽孢杆菌未进行探测。M :0.24-9.5 kb RNA阶梯。7.5 kb波段（指示）在胚胎、Huh7和HeLa细胞通道中是一种核前体RNA。
用于低拷贝转录本敏感分析的优质RNA。
可重复的高质量RNA产量。
全自动RNA纯化的可重复性。
四、应用程序
使用 RNeasy 和 QIAwave RNA 技术纯化的 RNA 260/280 比值为 1.9-2.1（在10mMTris·Cl，pH7.5中测量），适用于所有应用。下游应用包括：
▶RNA测序
▶定量实时RT-PCR
▶从仅一个细胞开始的实时RT-PCR
▶终点RT-PCR
▶北方、点状和槽状斑点
▶阵列分析
▶poly A+ RNA选择
五、试剂盒组份表
| RNeasy Mini Kit | (50) |
| Catalog no. | 74104 |
| Number of preps | 50 |
| RNeasy Mini Spin Columns (pink) | 50 |
| Collection Tubes (1.5ml) | 50 |
| Collection Tubes (2ml) | 50 |
| Buffer RLT | 45ml |
| Buffer RW1 | 45ml |
| Buffer RPE(concentrate) | 11ml |
| RNAse-Free Water | 10ml |
| Quick-Start Protocol | 2 |
六、实验原理
1.样本裂解：使用含高浓度胍盐的Buffer RLT裂解样本，破坏细胞膜和核膜，释放RNA，并使RNase失活，保护RNA不被降解。
2.RNA结合：裂解液中加入乙醇调节核酸结合条件后，将样本裂解物加载到RNeasy Mini Spin Columns上，RNA在高盐条件下特异性吸附于硅胶膜表面。
3.杂质洗涤：通过Buffer RW1去除残留的蛋白质、多糖等大分子杂质，再用经乙醇稀释的Buffer RPE洗涤去除盐分和小分子污染物，确保硅胶膜上仅保留RNA。
4.RNA洗脱：用无RNase的RW1-Free Water或低盐缓冲液（如TE缓冲液）洗脱硅胶膜上的RNA，获得高纯度、高完整性的总RNA。
七、操作步骤概要
1.培养细胞：直接加入Buffer RLT裂解，或离心收集细胞后重悬裂解。
2.动物组织：新鲜或冷冻组织需在液氮中研磨成粉末后加入Buffer RLT裂解。
3.植物/细菌/酵母：根据样本类型，可能需要先进行预处理（如酶解、机械破碎）后再加入Buffer RLT。
（2）RNA结合：
向裂解液中加入指定体积的70%乙醇，混匀后将混合物转移至RNeasy Mini Spin Column，12,000×g离心30~60秒，弃滤液。
（3）洗涤：
1.加入Buffer RW1至离心柱，12,000×g离心30~60秒，弃滤液和收集管。
2.将离心柱转移至新的2ml收集管，加入经乙醇稀释的Buffer RPE，12,000×g离心30–60秒，弃滤液。
3.重复加入Buffer RPE进行第二次洗涤，12,000×g离心2分钟，彻底去除残留洗涤液。
（4）RNA洗脱：
将离心柱转移至1.5ml收集管，加入30–50μl RNase-Free Water（可根据需要调整体积），室温静置1分钟，12,000×g离心1分钟，洗脱RNA。
八、注意事项
九、故障排除（常见问题与解决方案）
| 问题 | 可能原因 | 解决方案 |
| RNA产量低 | 样本裂解不充分； 洗脱体积过大； 离心柱堵塞 |
确保样本彻底裂解（如组织研磨充分）； 减少洗脱体积（如使用30μl）； 离心前确保裂解液无沉淀 |
| RNA纯度低（OD260/OD280<1.8） | 蛋白质残留； Buffer RPE洗涤不充分 |
增加Buffer RW1洗涤次数； 确保Buffer RPE按要求加入乙醇并充分洗涤； 避免样本过量 |
| RNA降解 | 样本处理时间过长； RNase污染 |
使用新鲜样本并快速处理； 严格无RNase操作； 确保Buffer RLT充分裂解并失活RNase |
十、存储RNeasy Mini Kit、RNeasy Protect Mini Kit（包括RNAprotect Tissue Reagent)和RNeasy Plant Mini Kit应储存在室温（15~25°C）干燥环境中，若标签上无其他说明，则在该条件下可稳定储存至少9个月。
RNAprotect试剂在较低温度下储存可能引起沉淀，使用前将沉淀物加热至37°C并振荡使其重新溶解。
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