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1
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Merck
- 英文名:
CLEAVAGE CONTROL PROTEIN
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文献和实验区域非常高,PAM识别位点可能不再重要。跑掉的那个虽然主要的焦点仍在Cas9核酸酶上——因为它是最具特征、最具商业价值的crispr系统酶,可用于基因组编辑实验——但该领域研究人员的注意力最近转移到了另一种蛋白质上。今年9月,张峰(Feng Zhang)和同事在《细胞》(Cell)上报道了一种新的rna引导的2类V系统内切酶:Cpf1。这种酶相对Cas9的一个主要优势是,它与CRISPR阵列的相互作用不依赖于tractRNA (Peter Fineran和他的同事提供了基因组生物学研究重点
一、引言 在许多的细胞生命活动中,例如 DNA 复制、mRNA 转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用的问题。 重组 DNA 技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要: 1. 鉴定分析参与基因表达调控的 DNA 元件。 2. 分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子。 这些问题的研究都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用。 研究 DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括
的IPTG量都是一致的,这样使蛋白表达浓度可以随着IPTG浓度而改变。通过对IPTG浓度的控制可以使细胞微量表达或者大量表达。一般说来,低浓度表达有利于蛋白的可溶性和活性。 二硫键形成与溶解性增强 二硫键的形成对某些蛋白的可溶性起到重要的作用,而Novagen也专门设计了一些菌株是谷胱甘肽还原酶(gor)和/或硫氧还蛋白还原酶(trxB)缺陷型的,包括AD494,BL21trxB, Origami,Origami B和Rosetta-gami™。在这些菌株中表达蛋白
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