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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
RNaseP-pseudovirus
- 供应商:
翌圣生物
- 保存条件:
-80℃保存,有效期6个月。本品应避免反复冻融,建议分装保存。
- 规格:
1 mL(18188ES03)
产品描述:
本品采用了逆转录病毒载体,载体装载了RNaseP病毒基因组部分序列。
本品在293T细胞内进行假病毒的制备,假病毒为逆转病毒外膜包裹。
本品用于RNaseP病毒核酸检测试剂能力验证以及提取试剂盒的性能验证,也可用于开展RNaseP病毒核酸检测实验室进行检测能力验证和实验室内质量控制等。
产品特色:
应用案例:
使用方法
1.假病毒融化:将假病毒从-80°C冰箱中取出,进行冰浴融化或置于4℃条件下自然融化,然后开始相关的实验操作。
2.假病毒灭活(可选项):在生物安全柜中吸取当次实验所需量的假病毒于EP管中,置于56℃条件下灭活30min。
3.假病毒核酸提取及QPCR检测:按照核酸提取试剂盒及QPCR测试剂盒的说明书要求进行相关的实验操作。
储存条件:
-80℃保存,有效期6个月。本品应避免反复冻融,建议分装保存。
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文献和实验良好的的基因治疗效果,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景。 慢病毒转染优点:1.外源基因表达水平较高、表达稳定;2.转染效率高,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞;3.慢病毒基因容易操作,易于制备大量病毒且滴度高;4.病毒基因组可整合到细胞基因组,易于构建稳定细胞株。 慢病毒包装技术:慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。将外源基因克隆进入表达载体,同时与包装质粒(表达病毒包装所需辅助蛋白)一起转染
稀释计数法 滴度单位:TU/ml,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。”TU”为”transducing units”的缩写,中文为“转导单位”,表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。 第一天 细胞准备 将生长状态良好的293T细胞消化计数后稀释至1×105/ml,加入96孔板,100µl/孔,为每个病毒准备10个孔。放入37℃,5%CO2培养箱中培养。 第二天 加病毒 在EP管中做10倍梯度稀释,连续10个稀释度。稀释方法如下:每种病毒准备10
自己做过不少实验,有些心得方法总结一下分享给大家。病毒滴度的测定常见方法有以下两种: 稀释计数法 滴度单位:TU/mL,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。「TU」为「transducing units」的缩写,中文为「转导单位」,表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。 第一天 细胞准备 将生长状态良好的 293 T 细胞消化计数后稀释至 1×100 000/mL,加入 96 孔板,100 μL/孔,为每个病毒准备 10 个孔
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