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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海臻诺生物科技有限公司
Roche 03515885001(3515885001)LightCycler® FastStart DNA MasterPLUS SYBR Green I
⚠️ 注意:适配老款转盘毛细管 LightCycler 2.0(Carousel),不是 LC480 板式仪器;用户标注 “384 reactions” 为笔误,原厂规格为480 次反应(20μL 体系)Roche Life...
✅ 基础规格
- 货号:03515885001
- 全称:LightCycler FastStart DNA MasterPLUS SYBR Green I
- 包装:480 次反应(20 μL 终体积);同系列小包装:03515869001 = 96 次
- 类型:5× 浓缩预混液
- 检测化学:SYBR Green I 染料法
🧪试剂盒组分
- 5×MasterPLUS 预混液(含化学修饰 FastStart HotStart Taq、dNTP、dUTP、SYBR Green I、缓冲体系)
- PCR 级纯水
用户自备:上下游引物、DNA/cDNA 模板;配方自带镁离子,无需额外添加 MgCl₂;可搭配 UNG 防污染。
📌原理特点
- HotStart 化学修饰 Taq:95℃预孵 10min 激活,抑制室温非特异性扩增
- SYBR Green I 结合双链 DNA 发光;扩增结束支持熔解曲线分析,验证产物特异性、区分引物二聚体
- 仅用于 DNA 模板 qPCR;RNA 样本需要先反转录得到 cDNA 再上机,不能一步 RT-qPCR
- 适配 LC2.0 毛细管体系,毛细管内快速升降温,扩增速度快
🎯兼容仪器
🧬应用场景
- cDNA / 基因组 DNA 的 SYBR Green 法荧光定量 PCR
- 引物筛选、基因表达定量(两步法 RT-qPCR 的 PCR 阶段)
- 熔解曲线分析,产物特异性验证
❄️储存条件
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文献和实验Real-time quantitative polymerase chain reaction (QPCR) using the Roche LightCycler� was used to verify the expression of asparagine synthetase (ASNS) identified by microarray analysis as a target of p53 transrepression and mutant p53
两个项目或设立检测项目的外对照和内对照。此外动态检测范围达10个数量级,而无须将样品稀释;具有熔点曲线分析功能可以鉴别基因型、检测点突变、检测非特异性扩增,具多种检测模式如Taqman探针、荧光染料SYBR Green I检测、序列特异杂交探针等;探针及引物设计方便,杂交探针及引物设计的限制少,而且亦可方便地选用合适大小的扩增子(100~1000bp)。但是Lightcycler需要使用特定的毛细管作为样品管,这在某种程度上提高了消耗成本,也不方便作为常规PCR仪使用。 Corbett
。 5. SYBR Green I: 这是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光[35]。它的最大优点就是可以与任意引物、模板相配合,用于任意反应体系中,从经济角度考虑,它也比其它的探针的价格要便宜得多,但由于它能与所有的双链DNA结合,所以一旦反应体系中出现非特异扩增,那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性[36]。要避免这种不利因素,一方面可以通过Lightcycler和Rotor gene、Smart gene等热循环
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