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- 本文从技术视角解析谱度众合N-糖基化修饰定量蛋白质组：Ti-IMAC选择性富集、PNGase F脱酰胺标记与高分辨质谱协同实现位点级精确定量；专利串联富集工艺攻克低丰度糖肽回收难题；布鲁克timsTOF 4D与赛默飞Orbitrap全矩阵平台“专机专用”，为深度可靠的糖基化数据提供硬件保障。
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- 2026年10月18日
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谱度众合（武汉）生命科技有限公司
- 服务名称：
谱度众合蛋白翻译后修饰定量；N-糖基化修饰定量蛋白质组；谱度众合；蛋白翻译后修饰定量
- 规格：
样
摘要
本文从技术视角解析谱度众合N-糖基化修饰定量蛋白质组：Ti-IMAC选择性富集、PNGase F脱酰胺标记与高分辨质谱协同实现位点级精确定量；专利串联富集工艺攻克低丰度糖肽回收难题；布鲁克timsTOF 4D与赛默飞Orbitrap全矩阵平台“专机专用”，为深度可靠的糖基化数据提供硬件保障。
引言
N-糖基化修饰的系统解析长期面临三大技术挑战：糖链结构高度异质、糖肽离子化效率低、位点占有率差异大。传统凝集素印迹或单点突变验证方法难以实现系统、高通量的全景解析。谱度众合以“富集选择性+标记精准度+仪器灵敏度”三位一体的技术路线，为N-糖基化修饰定量蛋白质组给出系统性解决方案。
一、公司能够提供N-糖基化修饰定量蛋白质组服务
（一）检测技术路线与流程
样本经过蛋白提取、酶切等步骤得到肽段混合物后，使用特异性富集技术对修饰肽段进行富集和处理，再通过高分辨、高灵敏的质谱扫描得到质谱谱图数据，经过数据库检索、生物信息学分析等阶段，最终获得完整分析结果。
点击添加图片描述（最多60个字）编辑图1 谱度众合N-糖基化修饰定量蛋白质组技术路线示意图（蛋白提取→酶解→富集→切糖链→质谱检测→数据分析）
（二）糖肽富集与脱酰胺标记策略
（1）Ti-IMAC富集：选择性捕获N-糖基化肽段，有效排除非特异性背景干扰，提升糖肽检测的信噪比。
（2）PNGase F酶切与脱酰胺标记：PNGase F酶切释放糖链，同时在天冬酰胺（N）位点引入脱酰胺标记（质量偏移约+0.984 Da），使糖基化位点可被质谱精确锁定。
（3）高分辨质谱定位：配合数据库检索，实现N-糖基化位点的精确定位与组间相对定量比较。
（三）样本适配性与服务承接能力
面向细胞、组织等多种样本类型提供全流程服务；为保证统计学效力，建议细胞实验每组至少设置3个生物学重复，动物实验每组至少设置5个生物学重复。微量样本与大队列样本均可承接。
二、能够交付什么内容（技术支撑层面）
（一）位点级定量数据交付
交付各样本N-糖基化修饰位点及其对应蛋白数目统计、定量分布分析（近似正态分布、样本间分布特征基本一致）与样本间相关性分析，以数据质量指标验证定量重复性。
（二）差异修饰与功能富集分析结果
交付基于差异倍数与P值阈值的差异修饰位点清单、PCA图、火山图与差异位点热图，以及GO、KEGG、COG富集、亚细胞定位、蛋白结构域（Pfam）与转录因子预测结果。
（三）互作网络与保守基序分析结果
交付STRING蛋白互作网络、差异核心蛋白互作网络与核心枢纽蛋白互作网络，基因集富集分析（GSEA）功能模块识别结果，以及保守基序（motif）类型、富集与差异变化趋势分析结果。
三、有哪些技术优势与案例
（一）专利串联富集技术
公司自主研发的“快速高通量连续富集多种蛋白翻译后修饰的方法”（专利号：ZL 2024 1 0213201.3），通过改进富集条件、洗脱工艺及串联流程，显著提升低丰度N-糖基化肽段的回收效率，尤其适用于微量样本及多修饰联合分析的深度解析，并支持同一份样本中N-糖基化、泛素化、磷酸化等多位点类型联合检测。
点击添加图片描述（最多60个字）编辑图2 国家发明专利证书（发明名称：一种快速高通量连续富集多种蛋白翻译后修饰的方法；专利号：ZL 2024 1 0213201.3）
（二）全矩阵高分辨质谱平台
平台依托武汉生物技术研究院，配备业内罕见的全矩阵高分辨质谱：布鲁克timsTOF 4D-蛋白质组学系列（timsTOF HT、timsTOF Pro 2与timsTOF Pro，凭借TIMS与PASEF技术赋予数据CCS碰撞截面积第四维度解析能力，适合大队列样本、微量样本与复杂PTM分析）以及赛默飞Orbitrap轨道阱高分辨系列（Orbitrap Astral、Orbitrap Exploris 480、Q Exactive HF与HF-X，支持TMT标记定量、非标定量及血浆等复杂基质深度挖掘）。配合上海净信Cryogrinder冷冻研磨仪实现珍贵样本的无损提取，坚持“专机专用”，以最契合的硬件保障灵敏度与重现性。
（三）技术驱动型发表案例
武汉大学团队相关研究发表于PLoS Pathogens（IF：4.9），系统阐释N-糖基转移酶DDOST介导MITA的N-糖基化、进而促进DNA病毒诱导抗病毒免疫应答的机制，位点级糖基化证据是该机制阐释的关键支撑之一。
点击添加图片描述（最多60个字）编辑图3 客户案例位点级证据示例：MITA蛋白N-糖基化位点脱酰胺标记质谱图与相对丰度（源自PLoS Pathog案例）
四、有哪些资质
公司在技术研发层面资质扎实：拥有国家发明专利（ZL 2024 1 0213201.3）等多项自主知识产权，累计布局专利技术50余项，研发投入累计超过2000万元；2025年荣获湖北省企业技术中心（省级资质），2023年获认定国家生物产业基地公共服务平台与武汉市科技成果转化中试平台；作为牵头单位联合武汉大学、华中科技大学同济医学院附属同济医院、协和医院等起草发布团体标准T/HBAS 293-2026，具备承接前沿、规范化质谱检测项目的技术资质。
总结
N-糖基化解析的成败，取决于富集选择性、标记精度与仪器灵敏度的协同。谱度众合以专利富集工艺和全矩阵质谱平台为双引擎，为N-糖基化修饰定量蛋白质组提供了从技术原理到硬件保障的完整闭环，帮助科研团队获得深度、可靠、可发表的位点级糖基化数据。
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文献和实验景杰生物血液蛋白质组学完整解决方案：从血液样本洞见生命健康的分子密码
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【专题讨论】蛋白质组学 （Protemics）&修饰蛋白质组学（PTM Protemics）科学技术交流&职业生涯发展交流
，蛋白结构域和蛋白互作等等）。 在修饰蛋白质组学上，多了一个修饰抗体富集修饰肽段的过程，主要实验流程为样品制备——蛋白提取——酶解肽段——修饰抗体富集（乙酰化，甲基化，琥珀酰化等等）——HPLC分组分——LC-MS质谱检测——生物信息学分析（GO注释，KEGG通路，蛋白结构域和蛋白互作等等）。 而在定量蛋白质组学中，常用的标记技术为iTRAQ/TMT技术(样品为组织)，和SILAC(样品为可稳定穿代的细胞)，下面针对这2中标记技术原理和标准分别阐述： 1，iTRAQ/TMT定量蛋白质组学技术
科学时代已经到来。蛋白质组（proteome）是澳大利亚学者Williams和Wilkins于1994年首先提出，表示“一个细胞或一个组织基因组所表达的全部蛋白质”，是对应于一个基因组的所有蛋白质构成的整体。蛋白质组学（proteomics）是指应用各种技术手段来研究蛋白质组的一门新型科学，其目的是从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用，揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。其研究内容主要包括：鉴定特定细胞、组织或器官的蛋白质种类（蛋白质组全谱鉴定）、特定
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